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詳細介紹
人主動脈平滑肌原代細胞
人主動脈平滑肌細胞分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象，探討心血管疾病相關發(fā)病機制是目前研究的熱點；體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Human Aortic Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 主動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7289 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人主動脈平滑肌細胞
組織來源：主動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
小鼠成肌細胞;C2C12 小鼠胰島細胞培養(yǎng)基 100mL | Rhesus antibody Rh Gentamicin 慶大抗體 規(guī)格 0.2ml |
TIMP-2(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶抑制因子2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/FITC FITC標記的小鼠抗IgG 0.3ml |
CD18： 整合素β2/Integrin β2抗體 0.1ml | ASMA(Human Anti-smooth muscle antibody) ELISA Kit 人抗平滑肌抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RFPL2/RFPL3 RET指蛋白樣2/3抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) /FITC 熒光素標記0酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Syntaxin 1a(Ser14) 0酸化突觸融合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml | TPO-Ab(Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody) ELISA Kit 小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 96T |
人間充質干細胞-肝 Human | 人腦靜脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
BSC-1細胞，猴腎細胞系 CHRF(人巨核細胞白血病) 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標簽) |
人口腔表皮樣癌細胞;KB | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3 |
CM-M067小鼠腎足突細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠肝竇內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
HeLa 229細胞，細胞 人低分化胃癌細胞,MKN-45細胞 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu | 人主動脈平滑肌原代細胞ASMA(Human Anti-smooth muscle antibody) ELISA Kit 人抗平滑肌抗體 96T |
IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000ml |
DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H076人心房肌細胞培養(yǎng)基100mL |
人正常肝細胞;L-02 | Rhesus antibody Rh APG7/ATG7 自噬相關蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml |
phospho-B-Raf (Ser729)： 0酸化B-Raf抗體 0.1ml | CM-R066大鼠膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
Anti-Sema4C/FITC 熒光素標記臂板蛋白4C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PCGF1： 表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體 0.2ml |
Anti-cdc25A /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠細胞分裂周期蛋白25抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | 人間充質干細胞-肝 Human |
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