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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 子宮組織 |
英文名稱(chēng) | Human Endometrial Stromal Cells | 貨號(hào) | YS-01X7619 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱(chēng)為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
OS-732細(xì)胞，骨肉瘤細(xì)胞(瘤株) 人細(xì)胞,SiHa細(xì)胞 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHA-sp NA | Hyp ELISA Kit 大鼠羥脯酸 96T |
RNF138： 環(huán)指蛋白138抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PUS10/CCDC139 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白139抗體 規(guī)格 0.2ml |
Anti-HDAC12/FITC 熒光素標(biāo)記組蛋白去乙?；?span>12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C17orf53： 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRCA1/BAP1 癌易感基因1抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-GCP-2/CXCL6 /FITC 熒光素標(biāo)記抗粒細(xì)胞趨化蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
FasL抗體 Anti-FasLAnti-FasL 0.1ml | phospho-ADAM17 (Thr735)： 0酸化CD156b抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR | 人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
Vero細(xì)胞，綠猴腎細(xì)胞 RSC96(大鼠雪旺細(xì)胞) 小鼠肉瘤瘤株;S180 | EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 |
大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 白細(xì)胞介素-1超家族 |
原代腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | CL-0104HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
CRFK貓腎細(xì)胞 CRFK feline kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 人子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞C17orf53： 17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO C1008 (E6) | CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;ERA-2 |
人胚胎胰腺組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HPE-2 | IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.3ml |
Rhesus antibody Rh GRM4/mGluR4 促代謝型谷受體4抗體 規(guī)格 0.1ml | 人絨癌細(xì)胞;JEG-3 |
ERp72： 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體 0.2ml | Anti-Iumbrokinase 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
MHC I /H-2 I (Mouse major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgR |
操作步驟：
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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