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詳細(xì)介紹
兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸系膜動(dòng)脈組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動(dòng)脈由背大動(dòng)脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi)，分布于消化管的動(dòng)脈。分成腸系膜上動(dòng)脈和腸系膜下動(dòng)脈。前者主要分布于小腸左側(cè)，后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。
英文名稱 | Rabbit Intestinal Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7185 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源：腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
大鼠肝細(xì)胞;BRL 膽囊癌細(xì)胞，GBC-SD細(xì)胞 CBRH7919細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞(wistar大鼠) | Rhesus antibody Rh GDPD3 甘油0酸二酯酶0酸結(jié)構(gòu)域3抗體 規(guī)格 0.2ml |
SP-B(Human Pulmonary surfatcant-associated protein B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml |
IL-15： 白介素15抗體 0.1ml | ICAM-3/CD50 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞間粘附分子3 96T |
Rhesus antibody Rh Retinoic acid induced 17 維誘導(dǎo)蛋白17抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-SYN1(Ser603) 0酸化突觸素1抗體 規(guī)格 0.1ml | PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長因子BB 96T |
LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞 Human | 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 |
SW116細(xì)胞，人大腸癌細(xì)胞 人葡萄膜黑色素細(xì)胞,UM細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;Caco-2 | Hep 3B(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
人正常前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1 | 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] |
人肺細(xì)胞;HLF-a | 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome T細(xì)胞，CTLL-2細(xì)胞 RTE細(xì)胞，大鼠氣管上皮細(xì)胞 | 兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞ICAM-3/CD50 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞間粘附分子3 96T |
CL-0203SCaBER(人膀胱鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
EFNA1 Others Rat 大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-H084人臍靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
EJ(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | Rhesus antibody Rh Apg10 自噬相關(guān)蛋白10抗體 規(guī)格 0.2ml |
phospho-Band3 (Tyr359)： 0酸化紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 0.1ml | Eca-109 人食管癌細(xì)胞 |
Anti-Phospho-SHIP2 (Tyr1135)/FITC 熒光素標(biāo)記0酸化蛋白酪0酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Proteasome 20S alpha 5： 蛋白酶體PSMα5抗體 0.2ml |
Anti-Cdc34/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞周期調(diào)控因子34IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞 Human |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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