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詳細(xì)介紹
兔多巴胺神經(jīng)元原代細(xì)胞
兔多巴胺元細(xì)胞分離腦組織；多巴胺元，即：胺能元，主要指含多巴胺的元，其細(xì)胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機(jī)體內(nèi)合成時(shí)以酪為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細(xì)胞來合成，這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動(dòng)，與軀體運(yùn)動(dòng)機(jī)能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時(shí)，可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine)，是NA的前體物質(zhì)，是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵遞質(zhì)，中樞系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響，末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用，以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的原物質(zhì)多巴胺(Dopamine)，則直接影響人們的情緒。從理論上來看，增加這種物質(zhì)，就能讓人興奮，但是它會(huì)令人上癮。多巴胺在前腦和基底節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn)，基底節(jié)負(fù)責(zé)處理恐懼的情緒，但由于多巴胺的緣故，取代了恐懼的感覺，因此有很多人的上癮行為，都是因多巴胺而起的。
英文名稱 | Rabbit Dopamine Neuron Cells | 組織來源 | 腦 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8337 |
細(xì)胞形態(tài) | 元細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞
組織來源：腦
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：元細(xì)胞樣
傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.125%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔多巴胺元細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔多巴胺元采用消化法、元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔多巴胺元經(jīng)TH免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076 | Neurokin B receptor： 激肽B受體抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh MC-1R 黑皮質(zhì)素-1受體抗體 規(guī)格 0.1ml | Anti-TSHR(CT)/FITC 熒光素標(biāo)記促甲狀腺素受體抗體(C端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
AKAP12A/SSeCKS peptide 絲酸抑制蛋白激酶C底物抗原 0.5mg | Anti-P2P-R/RBBP6 增殖潛能相關(guān)蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
Anti-GAPDH(human)/FITC 熒光素標(biāo)記3-0酸甘油醛脫氫酶(人)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC16A7/MCT2 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Phospho-FAK (Tyr861) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化粘著斑激酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Anti-ATF3/FITC 熒光素標(biāo)記活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
IL5 Others Canine 狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物HMSC-bm L | GPNMB Others Mouse 小鼠 GPNMB / Osteoactivin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人肝細(xì)胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系 其它 | MVK Others Human 人 MVK / Mevalonate kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
KM小鼠腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422 | 兔多巴胺神經(jīng)元原代細(xì)胞Anti-P2P-R/RBBP6 增殖潛能相關(guān)蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5 |
氣道平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | AGS(人胃腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R051大鼠子宮頸上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人支氣管上皮樣細(xì)胞;BEAS-2B |
雜交瘤(B類);C3110D2E11 前列腺癌細(xì)胞，Lncap細(xì)胞 H4-II-E-C3細(xì)胞，大鼠肝細(xì)胞瘤 | GPRIN1： G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)突增生蛋白1抗體 0.2ml |
Human plasminogen activator inhibitor,PAI ELISA Kit 人纖溶酶原激活物抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | FLRT2 Others Human 人 FLRT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Nogo受體作用蛋白抗體 Anti-Lingo-1 0.2ml | 17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T |
phospho-ATR (Ser428)： 0酸化ATR抗體 0.1ml | IL5 Others Canine 狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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