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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10? |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | YS-01X7754 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
詳細(xì)介紹
兔肺動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞
兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈亦稱肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室，在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行，在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈，經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室，在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行，至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗，經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一，在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明，急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓，即缺氧性肺動(dòng)脈高壓，推斷缺氧可能是通過(guò)促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞主要功能：①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng)；②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓；②先天性肺動(dòng)脈狹窄；③肺動(dòng)脈栓塞。
英文名稱 | Rabbit Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells | 組織來(lái)源 | 肺動(dòng)脈 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7754 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
組織來(lái)源：肺動(dòng)脈
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈平滑肌采用蛋白酶 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肺動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
ECV-304細(xì)胞，人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 銅綠假單胞桿菌(綠膿桿菌) 人真皮成纖維細(xì)胞-總RNAHDF-a NA | ADAM12： 去整合素樣金屬蛋白酶12抗體 0.2ml |
Anti-HRG-alpha Heregulin α蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受體抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標(biāo)記嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Rhesus antibody Rh Hyp/hydroxyproline 羥抗體 規(guī)格 0.2ml |
IDE 胰島素降解酶(抗原) 0.5mg | Phospho-HSL (Ser865)： 0酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 0.1ml |
IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml | Rhesus antibody Rh factor XIII 13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子) 規(guī)格 0.2ml |
R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A |
HPAC細(xì)胞，人胰腺腺泡上皮癌 人舌癌細(xì)胞,T6細(xì)胞 雜交瘤(B類);C3110D2E11 | JEG-3(人絨毛膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
原代骨細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml | OSM Protein Mouse 重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
Hepa1-6小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse hepatoma cell line Hepa1-6 DMEM+10% FBS | 兔肺動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞Rhesus antibody Rh Hyp/hydroxyproline 羥抗體 規(guī)格 0.2ml |
人食管癌細(xì)胞;EC109 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SHZ-88大鼠癌細(xì)胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
NeuroFectagen? 細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | Rhesus antibody Rh IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml |
FFA(Mouse free fatty acids) ELISA Kit 小鼠游離脂肪酸 96T | BTC Protein Mouse 重組小鼠 BTC / Betacellulin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) |
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg | Free-T3(Human Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 人游離三碘甲狀腺原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
MEGF10： 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白Megf10抗體 0.2ml | R 1610(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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