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詳細介紹
兔骨髓來源內皮祖原代細胞
兔骨髓來源內皮祖細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞，亦稱為成血管細胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞，缺乏成熟內皮細胞的特征性表型，不能形成管腔樣結構，其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復。研究顯示，內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路，EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。
英文名稱 | Rabbit Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X8358 |
細胞形態(tài) | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔骨髓來源內皮祖細胞
組織來源：骨髓
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代；不建議多次傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔骨髓來源內皮祖細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔骨髓來源內皮祖采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔骨髓來源內皮祖經CD34免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
FD4細胞，人淋巴細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞 小鼠畸胎瘤細胞,F9細胞 CM-H095人骨骼肌細胞培養(yǎng)基100mL | Rhesus antibody Rh GDF8/MSTN 生長分化因子8抗體 規(guī)格 0.2ml |
TGM2(human transglutaminase 2C polypeptide) ELISA Kit 人轉谷氨酶2C多肽Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
IDH1： 異檸檬酸脫氫酶1抗體 0.2ml | CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降鈣素 96T |
Rhesus antibody Rh RENT1/hUPF1 ATP依賴解旋酶RENT1抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Leptin receptor/FITC 熒光素標記瘦素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser24) 0酸化原癌基因蛋白18抗體 規(guī)格 0.1ml | CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子 96T |
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | EC9706 食管癌 |
SW620人結腸癌細胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS | TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽) |
大鼠腦動脈血管內皮細胞培養(yǎng)基 100mL | IFNA10 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 標簽) |
人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810] | 人肺動脈平滑肌細胞裂解物HPASMCL |
Hs 746T人胃癌細胞 Hs human gasic cancer cells 746T DMEM+10% FBS | 兔骨髓來源內皮祖原代細胞CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降鈣素 96T |
CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 | P815(小鼠肥大細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H101新生兒表皮角化細胞培養(yǎng)基100mL |
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21 | Rhesus antibody Rh APBB1/Fe65 protein 鐵蛋白Fe65抗體 規(guī)格 0.1ml |
beta subunit Cholera Toxin： 腸毒素β鏈抗體 0.2ml | HCT-15 人結腸癌細胞 |
Anti-VEGF/FITC 熒光素標記VEGF抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | PLAC8： 胎盤特異基因8蛋白抗體 0.2ml |
Anti-CDK6/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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