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詳細(xì)介紹
兔呼吸道上皮原代細(xì)胞
兔呼吸道上皮細(xì)胞分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過(guò)的通道，有肺脊椎動(dòng)物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹(shù)。氣管樹(shù)是隨著動(dòng)物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的。整個(gè)呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤(rùn)和凈化吸入的空氣，對(duì)于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內(nèi)表面覆蓋著黏膜，黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假?gòu)?fù)層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內(nèi)表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成?？瓷先ハ駨?fù)層上皮，但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假?gòu)?fù)層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細(xì)胞可分泌粘液，包裹著大量細(xì)菌，借助纖毛不斷擺動(dòng)將其慢慢移動(dòng)至出消化道。
英文名稱 | Rabbit Respiratory Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 呼吸道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8367 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔呼吸道上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：呼吸道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔呼吸道上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1 | TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
chemerin： 趨化素抗體 0.1ml | GAS 6： 生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CDKN2D/p19 INK4d 細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2D抗體 規(guī)格 0.2ml | Phospho-PPAR Gamma (ser273)： 0酸化過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ 0.1ml |
Anti-Phospho-NMDAR2A (Tyr1325) /FITC 熒光素標(biāo)記0酸化谷受體2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | ER- Beta (Estrogen receptor-beta) peptide 雌激素受體β抗原 0.5mg |
IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MelanA： 黑色素瘤相關(guān)抗原/黑色素-A抗體 0.1ml |
PRC1 Others Human 人 PRC1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | EFNA3 Others Mouse 小鼠 EFNA3 / Ephrin-A3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNAHA-h cDNA | CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
SMOC1 Others Human 人 SMOC1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
OVCAR-3(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Pig MSC豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Pig MSC of porcine bone marrow mesenchymal stem cells DMEM低糖+10% FBS+glutamin |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;Mao | 兔呼吸道上皮原代細(xì)胞Phospho-PPAR Gamma (ser273)： 0酸化過(guò)氧化酶活化增生受體γ抗體 PPARγ 0.1ml |
MCF7細(xì)胞，人癌細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞,HCC38細(xì)胞 髓核細(xì)胞生長(zhǎng)添加物NPCGS | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29 |
615小鼠癌瘤株;Ca763 | ROBO4 Others Mouse 小鼠 ROBO4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | Anti-IL-17F/IL-24/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17F抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-SARS putative orflab polyprotein 抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL |
Rhesus antibody Rh Phospho-p56Dok2(Tyr351) 0酸化D酪激酶衰減蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh Kif14 protein 驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml |
Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 96T | PRC1 Others Human 人 PRC1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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