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詳細介紹
兔脊髓神經(jīng)干原代細胞
兔脊髓干細胞分離自脊髓組織；脊髓是細細的管束狀的結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護；是源自腦的中樞系統(tǒng)延伸部分。中樞系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的信息。人和脊椎動物中樞系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對的，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由細胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū)，主要由有髓纖維組成；脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的（稱為脊）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍與腦之間的通路，也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對脊就是由不同的脊椎發(fā)出的。干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生組織的各類細胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有組織中，不同的干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同，分布也不同。干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應(yīng)能力。干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力，已成為系統(tǒng)損傷修復(fù)和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的干細胞培養(yǎng)模型是其基礎(chǔ)和臨床應(yīng)用的前提。干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成球，球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。
英文名稱 | Rabbit Spinal Cord Neural Stem Cells | 組織來源 | 脊髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8369 |
細胞形態(tài) | 球形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脊髓神經(jīng)干細胞
組織來源：脊髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：球形
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔脊髓干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔脊髓干采用消化后差速貼壁，結(jié)合干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔脊髓干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
M1細胞，小鼠白血病細胞 脆弱擬桿菌 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞;NBTF | 酸化肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體 |
酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體 |
腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 | 酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 |
軸突蛋白2抗體 | 酸化肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體 |
酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 | 轉(zhuǎn)錄因子LBX1抗體 |
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) | T739小鼠肺腺癌瘤株;LA795 |
HCCC-9810細胞，人肝癌亞力山大細胞 人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細胞株,7WCY1.0細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2 | Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2 |
C57BL/6小鼠干細胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice | SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人結(jié)腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 人氣管平滑肌細胞裂解物HTSMCL |
SW1353細胞，人骨肉瘤細胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細胞;WI-38 | 兔脊髓神經(jīng)干原代細胞酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體 |
CL-0237U251(人膠質(zhì)瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EVI2A Others Human 人 EVI2A 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H109人破骨細胞培養(yǎng)基100mL |
IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽) | 酸化原癌基因c-kit抗體 |
軸突蛋白2抗體 | 家貓肺細胞;FCA-L2 |
酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 | 腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體 |
酸化原癌基因c-kit抗體 | CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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