化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔顱蓋造骨原代細(xì)胞
兔顱蓋造骨細(xì)胞分離自顱骨組織；造骨細(xì)胞（osteoblast）亦稱成骨細(xì)胞。是參與骨組織形成的細(xì)胞。顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護(hù)和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進(jìn)行著重建，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機(jī)制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。
英文名稱 | Rabbit Calvarial Osteoblast Cells | 組織來源 | 顱骨 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8384 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔顱蓋造骨細(xì)胞
組織來源：顱骨
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔顱蓋造骨細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顱蓋造骨采用膠原酶消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔顱蓋造骨經(jīng)ALP染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆;L-929 [L929] | FRMD6蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體 | 酸化有絲分裂激酶A抗體 |
活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫氨酶抗體 | 胰腺衍生因子抗體 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 | FRMD6蛋白抗體 |
胰腺衍生因子抗體 | 酸化有絲分裂激酶A抗體 |
PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人骨骼肌成肌細(xì)胞裂解物HSkMML | VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
BMPR2 Others Human 人 BMPR-II 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 人臍帶靜脈平滑肌細(xì)胞 (HUVSMC)( 5×105 ) |
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞，人卵巢癌細(xì)胞 人支氣管上皮細(xì)胞,HBE細(xì)胞 腦膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 | 兔顱蓋造骨原代細(xì)胞胰腺衍生因子抗體 |
A875細(xì)胞，人黑色素瘤細(xì)胞 阪崎腸桿菌 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620] |
EC-304? 人血管內(nèi)皮細(xì)胞 | LY96 Others Mouse 小鼠 LY-96 / ESOP-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 正常細(xì)胞 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A | 酸化載脂蛋白A1抗體 |
芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體 | 兔主動脈平滑肌細(xì)胞;SMC 白血病細(xì)胞，L1210細(xì)胞 SH2細(xì)胞，小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 |
G蛋白偶聯(lián)受體77抗體 | 活化誘導(dǎo)胞嘧啶核苷脫氨酶抗體 |
酸化載脂蛋白A1抗體 | PLBD2 Others Human 人 PLBD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)