詳細(xì)介紹
兔腦靜脈血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
兔腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理;小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的主要功能是維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡,合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)參與免疫反應(yīng),維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡。
英文名稱 | Rabbit Brain Venous Endothelial Cells | 組織來源 | 腦靜脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7188 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞
組織來源:腦靜脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔腦靜脈血管內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔腦靜脈血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠黑質(zhì)元MN-sn | FRMD4B蛋白抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體57抗體 | 酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 |
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 | F-box蛋白38抗體 |
酸性酸酶抗體 | FRMD4B蛋白抗體 |
F-box蛋白38抗體 | 酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 |
CST3 Others Rat 大鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人肝臟間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC-hp | TLK1 Others Human 人 TLK1 / PKU-beta 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
DLL4 Others Human 人 DLL4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人胚胎氣管組織來源細(xì)胞;CCC-HBE-2 人肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | RKO-E6(人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Jecket(淋巴瘤細(xì)胞) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908 | 兔腦靜脈血管內(nèi)皮原代細(xì)胞F-box蛋白38抗體 |
大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(ROPC)(5×105) SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系 Human | CL-0382MDA-MB-415(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
FIGF Protein Human 重組人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 標(biāo)簽) | C6-RFP(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 C6-RFP (leiviral consuct stable sain) of rat brain glioma cells DMEM+10% FBS |
CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 脂肪酸去飽和酶1抗體 |
酸性酸酶抗體 | F11R Others Mouse 小鼠 F11R / JAM-A / JAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白偶聯(lián)受體57抗體 | 抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 |
脂肪酸去飽和酶1抗體 | CST3 Others Rat 大鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。