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詳細介紹
兔破骨原代細胞
兔破骨細胞分離自骨組織和骨髓；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞，屬于不增殖細胞群，不能增殖和傳代，只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
英文名稱 | Rabbit Osteoclast Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7868 |
細胞形態(tài) | 多核、巨細胞 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔破骨細胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：多核、巨細胞
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔破骨細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔破骨經(jīng)TRAP染色檢測，純度可達30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6] | FAM21C蛋白抗體 |
高爾基復合體CFR1抗體 | 自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 | 成纖維細胞生長因子8抗體 |
酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體 | FAM21C蛋白抗體 |
成纖維細胞生長因子8抗體 | 自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝內(nèi)膽管上皮細胞裂解物HIBEpiCL | NRG1 Others Human 人 NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
S-180(小鼠肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 人細胞裂解液 (陽性對照) | CHODL Others Mouse 小鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝竇內(nèi)皮細胞 (HHSEC) ( 5×105 ) 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs) Rattus | CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KM9801 | 兔破骨原代細胞成纖維細胞生長因子8抗體 |
EGFL7 Others Human 人 EGFL7 / VE-statin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | XCL2 Protein Human 重組人 XCL2 蛋白 (His 標簽) |
犬腎細胞;MDCK(NBL-2) | 人小腦顆粒細胞 (HCGC)( 5×105 ) 人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs) EC109，人食管癌細胞 |
HCT-8 [HRT-18]人回盲腸癌細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 纖維蛋白原抗體 |
酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體 | CD44 Others Human 人 CD44 人細胞裂解液 (陽性對照) |
高爾基復合體CFR1抗體 | 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 |
纖維蛋白原抗體 | SERPINB3 Others Human 人 SerpinB3 / SCCA-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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