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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的兔臍帶間充質(zhì)干采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔臍帶間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔臍帶間充質(zhì)干原代細胞 | 組織來源 | 臍帶組織 |
英文名稱 | Rabbit Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells | 貨號 | YS-01X7167 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔臍帶間充質(zhì)干細胞分離自臍帶；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。當卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達起來，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì)。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒來的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運走，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒。臍帶中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結(jié)出各種不同的果實——血液細胞、細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD）及其他移植相關并發(fā)癥。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞 小鼠T細胞,CTLL-2細胞 HT-29(人結(jié)腸癌細胞) | 酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 |
酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 | 轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體 |
腫瘤抑制基因p53抗體 | 酸化前整合位點蛋白1抗體 |
主導控制樣蛋白2抗體 | 酸化細胞分裂周期蛋白25C抗體 |
酸化前整合位點蛋白1抗體 | 轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體 |
小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 | 人腦膜細胞培養(yǎng)基 100mL |
MC53細胞，小鼠腎系膜細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細胞;F81 | EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (His 標簽) |
H1299 人肺腺癌細胞 | TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標簽) |
CM-R102大鼠腦靜脈血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | CL-0156MFC(小鼠胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
RKO-AS45-1人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細胞 Human colon cancer RKO-AS45-1 ansgenic cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | 兔臍帶間充質(zhì)干原代細胞酸化前整合位點蛋白1抗體 |
肺癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | NFS-60細胞，小鼠白血病細胞G-CSF依賴性 HeLa [ Chang Liver ](張氏肝細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 |
MA-782(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) | IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 標簽) |
HAL-01 人急性混合型白血病細胞 | 酸化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體 |
主導控制樣蛋白2抗體 | 人束膜細胞HPC |
酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 | 腫瘤抑制基因p53抗體 |
酸化腫瘤抑制基因LATS1/LATS2抗體 | 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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