化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
兔全骨髓原代細胞
兔全骨髓細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細胞即骨髓內(nèi)除紅細胞外的全部細胞。
英文名稱 | Rabbit Whole Bone Marrow Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8419 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔全骨髓細胞
組織來源：骨髓
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：懸浮
細胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔全骨髓細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔全骨髓細胞采用沖洗骨髓、紅細胞裂解法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔全骨髓經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP | FAM129B蛋白抗體 |
核苷酸結(jié)合蛋白2抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9抗體 | FK506結(jié)合蛋白38抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 | FAM129B蛋白抗體 |
FK506結(jié)合蛋白38抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | RH-35(大鼠肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺轉(zhuǎn)化細胞;AE1201 | 人結(jié)腸平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 ) |
EPHB4 Others Mouse 小鼠 EPHB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) | ADAMTSL1 Others Human 人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) | 家豬皮膚細胞;SSC-S1 癌細胞，ZR-75-1細胞 NS1細胞，小鼠骨髓瘤細胞 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29 | 兔全骨髓原代細胞FK506結(jié)合蛋白38抗體 |
293T/17細胞，SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞(亞系) 鼠小腦細胞,C8-D1A細胞 CL-0259BC-020(人癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人口腔角質(zhì)細胞HOK |
人成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
ESAM Others Human 人 ESAM 人細胞裂解液 (陽性對照) | 核仁纖維蛋白抗體 |
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 | K-562人慢性髓原白血病細胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBS |
核苷酸結(jié)合蛋白2抗體 | 腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9抗體 |
核仁纖維蛋白抗體 | EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)