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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠NG2采用酶消化、專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠NG2經(jīng)NG2免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠NG2原代細(xì)胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Mouse NG2 Cells | 貨號 | YS-01X7504 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
小鼠NG2細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。NG2細(xì)胞是在發(fā)育和成年中樞系統(tǒng)的灰質(zhì)和白質(zhì)束中發(fā)現(xiàn)的，因表達(dá)NG2蛋白多糖而得名。NG2細(xì)胞先前被假定代表少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞，后來使用轉(zhuǎn)基因的研究表明，NG2細(xì)胞在體內(nèi)不僅能夠產(chǎn)生少突膠質(zhì)細(xì)胞，還能產(chǎn)生原漿性星形膠質(zhì)細(xì)胞以及某些情況下的元。NG2細(xì)胞是中樞系統(tǒng)中不同于元、成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的一類細(xì)胞亞群。此外，在發(fā)育和成年中樞系統(tǒng)的多個(gè)區(qū)域，發(fā)現(xiàn)NG2細(xì)胞和元之間存在的突觸聯(lián)系，暗示NG2細(xì)胞除了可能作為分化成多種細(xì)胞的可塑性前體細(xì)胞群，還可能會(huì)和元聯(lián)系從而形成一個(gè)的膠質(zhì)網(wǎng)絡(luò)。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)豬腎上皮細(xì)胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin | 骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2抗體 |
RET指蛋白樣2/3抗體 | 細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 |
酸羧化酶2抗體 | 蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 |
甘丙肽樣肽GALP抗體 | 配對盒基因1抗體 |
鋅指蛋白350/乳腺癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體 | 肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體 |
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
U-2 OS-EGFP+puro人骨肉瘤細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS-EGFP+puro McCoy's 5A+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin | CD40LG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
人羊膜上皮細(xì)胞HAmEpiC | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1022 |
乳蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
恒河猴胚腎細(xì)胞;FRhK-4 [FRhK4] 組織細(xì)胞淋巴瘤，U937細(xì)胞 A-673(橫紋肌瘤細(xì)胞) | 小鼠NG2原代細(xì)胞蛋白激酶A錨定蛋白95抗體 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1 | KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HOPC-os細(xì)胞，人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞 構(gòu)巢曲霉 人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293] | 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基MCDM |
T-110B透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 四分子交聯(lián)體14抗體（四旋蛋白） |
肺Kruppel樣因子抗體 | EFNA5 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
抑癌蛋白EZH2抗體 | 白細(xì)胞介素31抗體 |
抗抗體 | IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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