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詳細(xì)介紹
小鼠腸系膜平滑肌原代細(xì)胞
小鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞分離自腸系膜動(dòng)脈組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動(dòng)脈由背大動(dòng)脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi)，分布于消化管的動(dòng)脈。分成腸系膜上動(dòng)脈和腸系膜下動(dòng)脈。前者主要分布于小腸左側(cè)，后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。腸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
英文名稱 | Mouse Mesenteric Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 腸系膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7722 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠腸系膜平滑肌細(xì)胞
組織來源：腸系膜組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸系膜平滑肌采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸系膜平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
體外管腔形成分析試劑盒IVTFA | KB抑制蛋白激酶α/β抗體 |
細(xì)胞中心粒蛋白抗體 | 腦多巴胺營養(yǎng)因子抗體 |
酸肌醇結(jié)合蛋白1抗體 | 粘膜血管定居因子抗體 |
殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體 | 形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 |
1號(hào)染色體開放閱讀框216抗體 | 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白HECW1抗體 |
STAT1 Others Human 人 STAT1 / p91 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB 人輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg | 三.小鼠正常細(xì)胞 |
CSF1R Others Human 人 M-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | FGFR4 Others Rat 大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 豬腎細(xì)胞;PK-15 子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞，HEC-1-B細(xì)胞 Fc細(xì)胞，615小鼠前胃癌瘤株 |
CM-R004大鼠氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠腸系膜平滑肌原代細(xì)胞粘膜血管定居因子抗體 |
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1 | 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞HCPEC |
CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | PROC Others Mouse 小鼠 PROC1 / Protein C / PROC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
hMNC-CB-c single donorula-pure 臍帶血來源的人類單核細(xì)胞 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC | CD68抗體 |
粒體離子肽酶1抗體 | CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)5×106cells/瓶×2 |
骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 | 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Z盤狀蛋白抗體 |
GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 | STAT1 Others Human 人 STAT1 / p91 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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