詳細介紹
小鼠肝動脈內(nèi)皮原代細胞
小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別肝臟的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈肝臟的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內(nèi)皮細胞是襯于肝動脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時高表達黏附分子,與血流中白細胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進出血管。
英文名稱 | Mouse Hepatic Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肝動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7138 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞
組織來源:肝動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠肝動脈內(nèi)皮采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠肝動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4 | 離子鈣接頭蛋白抗體 |
p53調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)蛋白1抗體 | 細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1 |
范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體 | 元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 |
少突膠質(zhì)細胞跨膜蛋白抗體 | DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 |
1號染色體開放閱讀框182抗體 | Heme結(jié)合蛋白2抗體 |
SLC3A2 Others Mouse 小鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解液 (陽性對照) | CW-2(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
人表皮黑色素細胞-中色素HEM-m | CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hMSC-AT Pellet 人體脂肪組織的間質(zhì)干細胞團塊 > 1 mio.cells 人腎皮質(zhì)上皮細胞總RNAHRCEpiC NA | HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人齒齦成纖維細胞 (HGF)( 5×105 ) RN-h, 大鼠海馬趾元 Rattus | 豬腎傳代細胞;IBRS-2 骨肉瘤細胞,MG-63細胞 LLT細胞,小鼠Lewis肺癌瘤株 |
CM-M089小鼠皮膚肥大細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠肝動脈內(nèi)皮原代細胞元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 |
Cyc-tAg細胞,小鼠T淋巴細胞瘤(SV40T抗原轉(zhuǎn)染) 人卵巢癌耐藥株,A2780/Taxol細胞 人肺動脈成纖維細胞裂解物HPAFL | 人脈絡(luò)叢上皮細胞總RNAHCPEpiC NA |
SD大鼠骨髓間質(zhì)干細胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells | ANGPTL4 Others Mouse 小鼠 ANGPTL4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 柯薩奇病毒A16型聚合酶3D |
低分子量蛋白7抗體 | C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me) 小鼠真皮成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
腦納素前體抗體 | 巢蛋白/上皮干細胞蛋白抗體 |
半乳糖凝集素12抗體 | SLC3A2 Others Mouse 小鼠 SLC3A2 / CD98 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。