詳細介紹
小鼠脂肪干原代細胞
小鼠脂肪干細胞分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,主要恢復(fù)組織細胞的修復(fù)功能,促進細胞的再生,恢復(fù)年輕面容的同時,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康、早衰等疾病,由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點:①具有自我更新及多向分化的潛能;②來源充足;③對供區(qū)的創(chuàng)傷較??;④獲得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細胞。
英文名稱 | Mouse Adipose Stem Cells | 組織來源 | 脂肪組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7602 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠脂肪干細胞
組織來源:脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠脂肪干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠脂肪干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人真皮成纖維母細胞-胎兒HDF-f | 免疫球蛋白超家族成員9抗體 |
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 | 10號染色體開放閱讀框140抗體 |
內(nèi)皮細胞受體蛋白酪激酶A抗體(腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白4) | 單核細胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
CD2抗體 | 松果體N甲基乙酰羥色胺抗體 |
9號染色體開放閱讀框93抗體 | 類白細胞抗原A抗體 |
CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細胞裂解液 (陽性對照) | Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1 |
綿羊皮膚細胞;OAR-S1 | IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
BST1 Others Human 人 CD157 人細胞裂解液 (陽性對照) | CTSS Others Mouse 小鼠 Cathepsin S / CTSS 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Promocell C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基2型套裝 500ml | A9小鼠皮下結(jié)締組織細胞 A9 mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS |
CL-0451SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠脂肪干原代細胞單核細胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
HGC-27人胃癌細胞(未分化) HGC-27 human gasic carcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS | 人膀胱基質(zhì)成纖維細胞cDNAHBdSF cDNA |
CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌)5×106cells/瓶×2 | IFNGR1 Others Rat 大鼠 IFNGR / IFNGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
KP-N-NS(人腎上腺母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani | CD44抗體 |
驅(qū)動蛋白KIF5A抗體 | 人羊膜上皮細胞 雙位點HC-KIT受體細胞株,DMF7細胞 BLO-11(小鼠骨骼成纖維細胞) |
原癌基因AF4蛋白抗體 | 軸索過度生長抑制因子B受體抗體 |
細胞膜糖蛋白M6b | CDH15 Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。