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小鼠ELISA試劑盒測(cè)定操作過(guò)程
閱讀:129 發(fā)布時(shí)間:2018-7-3提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 4.7KB |
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小鼠ELISA試劑盒測(cè)定操作過(guò)程
1、設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)孔8孔(根據(jù)樣品蛋白濃度可調(diào)整為6孔),每孔中先各加入樣品稀釋液100 ul,孔再加標(biāo)準(zhǔn)品100 ul,混勻后用移液器吸出100 ul,移至第二孔,如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋至第7孔,后,從第7孔中吸出100 ul棄去,使之體積均為100 ul。第8孔為空白對(duì)照。
2、加樣:待測(cè)樣品孔中每孔各加入待測(cè)樣品100ul。
3、將反應(yīng)板置于37 ℃×120 min。
4、洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上扣干。
5、每孔中加入抗體工作液50ul。
6、將反應(yīng)板充分混勻后置37 ℃×60 min。
7、洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4~6次,向?yàn)V紙上扣干。
8、每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。
9、將反應(yīng)板置于37 ℃ 120 min。
10、洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4~6次,向?yàn)V紙上扣干。
11、每孔中加入底物工作液100ul, 置于37 ℃暗處反應(yīng)5~10 min。
12、每孔中加入50ul終止液混勻。
13、用酶標(biāo)儀在492 nm處測(cè)吸光值。
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