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ELISA試劑盒加液過程中需要注意什么?
閱讀:116 發(fā)布時間:2018-8-22提 供 商 | 上海撫生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 67.5KB |
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ELISA試劑盒加液過程中需要注意什么?
ELISA試劑盒在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,靈敏度高和特異性強的特點更是*。那我們在實驗中,如遇到試劑盒需要加液,那加液的過程中是不是也有我們應(yīng)該注意的地方呢?今天勁馬小編就給大家?guī)碛嘘P(guān)“ELISA試劑盒加液過程中需要注意什么”的解答,下面請看具體講解。
在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標本,加酶結(jié)合物,加底物。
加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
加標本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成
作為ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標記的ELISA測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。
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