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人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒說明書

閱讀:93          發(fā)布時間:2021-4-29
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人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒說明書
1、 試劑盒簡介貨為了適應(yīng)人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒快速檢測和疫病研究的需要,本公司參照 OIE 國際標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的引物序列,經(jīng)多次實驗及系統(tǒng)優(yōu)化,開發(fā)了本試劑盒。應(yīng)用本試劑盒進行檢測具有快速、靈敏、特異、準(zhǔn)確、安全操作簡單、應(yīng)用廣泛和高通量檢測等特點及優(yōu)點。2、試劑盒組成:
試劑盒組成包括核酸提取試劑和核酸擴增試劑,具體組成參見表 1:
表 1:試劑盒組成(50test/盒)

      

操作流程

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
                                          每個樣品測試反應(yīng)體系配制見下表 2。

                                               

注意事項

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

9.不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。 

樣本:血清 血漿 組織勻漿等液體樣本

標(biāo)記物:血清 血漿 組織勻漿等

應(yīng)用:僅用科研實驗檢測定量,定性檢

檢測方法:夾心法

技術(shù)要求:全程按說明書步驟檢測,操作規(guī)范,專業(yè),儀器設(shè)備齊全。

規(guī)格:48t/96t 

性狀:液體 

運輸方式:快遞發(fā)貨 

有效期:6個月品

特點

1.專一性強??乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。

2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。

5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。

6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。

7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及應(yīng)用單位均易購置.

用途:用于測定人血清、血漿、組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。

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