操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱(chēng):ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)
英文名稱(chēng):HA130 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期:1~3天 HA130是一種選擇性的ATX(autotaxin)抑制劑,IC50為28nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1229652-21-4 別名:HA-130 純度:98.09% 分子量:463.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
美味側(cè)耳Bacillus cereus雞白介1(IL-1)ELISA試劑盒
芽孢桿菌屬Bacillus cereus雞病性腸炎病(DEV)ELISA試劑盒
脫硫戈登氏菌Bacillus cereus雞病性腸炎病(DEV)ELISA試劑盒
釀酒酵母Bacillus cereus雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA試劑盒
HPAF-II培養(yǎng)基Bacillus cereus雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA試劑盒
海參珊瑚寄生菌Bacillus thuringiensis雞白介9(IL-9)ELISA試劑盒
茄絲核菌Lysinibacillus sphaericus雞白介9(IL-9)ELISA試劑盒
人型副球菌Bacillus thuringiensis雞白介3(IL-3)ELISA試劑盒
紅球菌Lysinibacillus sphaericus雞白介3(IL-3)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種Lysinibacillus sphaericus雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
死亡谷芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus雞白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
米曲霉Lysinibacillus sphaericus雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
根瘤菌Lysinibacillus sphaericus雞轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒
需鈉弧菌Lysinibacillus sphaericus雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Lysinibacillus sphaericus雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
總狀共頭霉(不賣(mài))Lysinibacillus sphaericus雞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體側(cè)孢短芽胞桿菌多殺性巴氏桿菌
滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體百脈根中間根瘤菌蜜蜂鏈球菌
炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體鄉(xiāng)間布丘氏菌馬腺疫鏈球菌獸疫亞種
S-腺苷蛋脫羧抗體巴氏微桿菌類(lèi)馬鏈球菌
ATX(autotaxin)抑制劑(HA130)L-正纈
其他L-2-基戊;L-原纈;L-正穿心排草基;L-(+)-2-基戊
英文名稱(chēng):L-Norvaline
其他英文名稱(chēng):L-2-Aminopentanoic acid;(S)-(+)-2-Aminopentanoic acid;L-α-Amino-n-valeric acid;L-α-Propyl gly
產(chǎn)品規(guī)格:BR,99%
包裝:1克/5克/25克/100克/500克
CAS號(hào):6600-40-4
C5H11NO2=117.15
級(jí)別:BR
含量:≥99.0%
比旋光度:+23.0o~+25.0o
干燥失重:≤0.5%
性狀:細(xì)粉末晶體或片狀或針狀結(jié)晶。熔點(diǎn):305℃(封管)。易溶于熱水,不溶于乙、、乙乙酯。
用途:生化研究,基分析標(biāo)準(zhǔn),鳥(niǎo)糞基基甲?;D(zhuǎn)移抑制劑。氣相色譜分析N-甲酰甲酯
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