培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
USP7-IN-1是新型USP7選擇可逆性小分子抑制劑,IC50值為33uM,對USP5、USP8、Uch-L1、Uch-L和Caspase的抑制劑弱或無(IC50>200uM),對HCT116細胞GI50值為67uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1381291-36-6 純度:99.77% 分子量:425.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蠟狀芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠過氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒
黑曲霉Pseudomonas fluorescens大鼠環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
桿狀毛霉Pseudomonas fluorescens大鼠環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒
波氏假性阿利什霉Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
三葉草根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒
金福菇Pseudomonas fluorescens大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒
壁芽孢桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒
蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種Pseudomonas fluorescens大鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒
裂褶菌Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒
草木樨中華根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
平菇(PL185)Pseudomonas fluorescens大鼠15脂加氧(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
大豆慢生根瘤菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
沃氏富鹽菌Pseudomonas fluorescens大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
油菜假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
早老蛋白-1抗體苜蓿莖點霉超氧化物歧化(SOD)分型測試盒(羥胺法)
突觸后密度蛋白95抗體污黑腐皮殼總超氧化物歧化(T-SOD)比色法測試盒(羥胺法)
一種腫瘤抑制基因抗體N端禾谷鐮孢菌谷胱甘肽還原(GR)比色法測試盒
甲狀旁腺激相關(guān)蛋白抗體三隔鐮刀菌總超氧化物歧化(SOD)比色法測試盒(WST-1 法)
USP7小分子抑制劑(USP7-IN-1)α-甲基-D-甘露糖苷
其他甲基-α-D-吡喃甘露糖苷
英文名稱:Methyl α-D-mannopyranoside
其他英文名稱:α-Methyl D-mannoside
產(chǎn)品規(guī)格:超純,99%
包裝:5克/25克/100克/500克
CAS號:617-04-9
C7H14O6=194.18
級別:Ultra pure grade
含量:≥99.0%
比旋光度:+79±2°(c=10% in H2O)
性狀:淺黃色粉末,熔點102℃,比旋光度-105o(C=0.25 water,25℃),略溶于水(2.5% solution 1:1 acetone:water),溶于吡啶
用途:生化研究。大腸埃希氏菌的快速測定
保存:-20℃