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詳細介紹
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱：mTOR抑制劑（WYE-125132）
英文名稱：WYE-125132 產品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg 發(fā)貨周期：1～3天 WYE-125132是ATP競爭性mTOR選擇性抑制劑，IC50為0.19nM，對PI3Ks及其相關的hSMG1和ATR抑制性較弱。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ CAS號：1144068-46-1 純度：98.39% 分子量：519.6 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
雞傳染性支氣管炎病Agrococcus baldri
谷棒桿菌Virgibacillus necropolis
黃暗青霉Rhodococcus aetherivorans
多根硬皮馬勃Dietzia natronolimnaea
卡門柏青霉Agrococcus citreus
動物雙歧桿菌乳亞種Dietzia psychralcaliphila
大腸埃希氏菌Virgibacillus carmonensis
里拉微球菌Salinibacterium amurskyense
普通青霉Colwellia polaris
地衣芽孢桿菌Colwellia sp.
Pseudoclavibacter soli Kim and Jung Halomonas gudaonensis
多形許旺酵母Marinobacter gudaonensis
焦曲霉Bacillus qingdaonensis
雞白痢沙門氏菌Halomonas sp.
埃里鏈格孢Shewanella psychrophila
蜜生假絲酵母Arthrobacter psygalactophilus
: ATCC14474資源名稱: 微黃分枝桿菌 質量規(guī)格：含量測定
海綿假單胞菌Pseudomonas│pachastrellae 質量規(guī)格：UV法溶出度檢查
圖畫大洋芽孢桿菌Oceanobacillus│picturae 質量規(guī)格：UV法含量測定
mTOR抑制劑（WYE-125132）L-甘-白二肽
其他甘酰-L-亮；甘-L-白；甘-L-閃白；甘-L-亮；N-甘酰-L-白；甘縮-L-閃白基
英文名稱：Gly-Leu
其他英文名稱：Glycyl-L-leucine
產品規(guī)格：BR,98%
包裝：1克/5克/25克
CAS號：869-19-2
C8H16N2O3=188.22
級別：BR
含量：≥98.0%
比旋光度：-36±1°
PH：5.0～6.5
鑒別：合格
鐵鹽：≤10ppm
重金屬：≤10ppm
砷鹽：≤1ppm
性狀：結晶粉末或片狀結晶。易溶于水，不溶于乙。加熱到246℃即成黃色。熔點：256℃(分解)
用途：生化研究
保存：RT
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