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詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
LDH Cytotoxicity Assay Kit | 100次|500次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒也稱乳酸脫氫酶檢測試劑盒(LDH Assay Kit)或乳酸脫氫酶釋放檢測試劑盒(LDH Release Assay Kit)，是一種基于diaphorase催化的INT顯色反應，通過比色法檢測細胞毒性時釋放的乳酸脫氫酶活性或檢測其它樣品中的乳酸脫氫酶活性的試劑盒。 本試劑盒可以用于常規(guī)的乳酸脫氫酶活性的檢測，更常用于以LDH釋放為指標的細胞毒性檢測。同時，基于細胞總乳酸脫氫酶活性的檢測，本試劑盒也可以用于檢測細胞增殖和細胞毒性檢測。 細胞凋亡或壞死而造成的細胞膜結構的破壞會導致細胞漿內(nèi)的酶釋放到培養(yǎng)液里，其中包括酶活性較為穩(wěn)定的乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)。通過檢測從質(zhì)膜破裂的細胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性，就可以實現(xiàn)對細胞毒性的定量分析。LDH釋放被看做細胞膜完整性的重要指標，并被廣泛用于細胞毒性檢測。LDH釋放被認為是以前使用放射性的51Cr標記細胞，隨后通過51Cr釋放進行細胞膜完整性檢測的安全有效的替代方法。 |
本試劑盒的基本原理是，在乳酸脫氫酶的作用下，NAD+被還原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脫氫酶(diaphorase)催化反應生成NAD+和強生色物甲臜(formazan)，在490nm波長下產(chǎn)生吸收峰，從而可以通過比色來定量乳酸脫氫酶的活性。吸光度與乳酸脫氫酶活性成線性正相關。該酶聯(lián)反應原理的示意圖如下：
試劑盒組份（100次為例）：
LDH釋放試劑——————1.5ml
乳酸溶液———————2ml
酶溶液————————1ml×2
INT溶液(10X)—————0.2ml
INT稀釋液——————2ml
儲存條件：-20℃，有效期一年
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乙型肝炎e抗原(HBeAg)elisa試劑盒英文名稱：HBeAg ELISA KitADCK1蛋白抗體包裝25g
乙型肝炎e抗體(HBeAb)elisa試劑盒英文名稱：HBeAb ELISA Kit?；o結合結構域蛋白4抗體包裝5g
乙酰A(acetyl-CoA)elisa試劑盒英文名稱：acetyl-CoA ELISA Kitα/β解酶4抗體包裝1g
乙酰膽轉移酶(CHAT)elisa試劑盒英文名稱：CHAT ELISA KitADCK2蛋白抗體包裝250mg
乙酰酯酶(AchE)elisa試劑盒英文名稱：AchE ELISA Kit乙脫氫酶16家庭A1抗體包裝1g
乙酰受體抗體(AChRab)elisa試劑盒英文名稱：AChRab ELISA Kit粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體包裝1g
乙酰膽(ACH)elisa試劑盒英文名稱：ACH ELISA Kit乙脫氫酶1抗體包裝250mg
胰脂肪酶(PL)elisa試劑盒英文名稱：PL ELISA Kitδ氨基乙酰酸脫酶抗體包裝1g
原酶(PK)elisa試劑盒英文名稱：PK ELISA Kit肌側索硬化癥相關蛋白4抗體包裝500mg
胰高血糖素樣肽2(GLP-2)elisa試劑盒英文名稱：GLP-2 ELISA Kitα2巨球蛋白(α-2M)抗體包裝250mg
胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒英文名稱：GLP-1 ELISA KitACCSL蛋白抗體包裝500mg
胰高血糖素(GC)elisa試劑盒英文名稱：GC ELISA Kit胎蛋白抗體包裝100mg
胰淀素(Amylin)elisa試劑盒英文名稱：Amylin ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體包裝25g
胰島細胞抗體(ICA)elisa試劑盒英文名稱：ICA ELISA Kit星形肌動蛋白抗體包裝1g
胰島素自身抗體(IAA)elisa試劑盒英文名稱：IAA ELISA Kit系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體包裝5g
激活素受體2A抗體胱天蛋白酶14(CASP14)Selumetinib (AZD6244) is a potent, highly selective MEK1 inhibitor with IC50 of
細胞毒性檢測試劑盒(乳酸脫氫酶法)棕櫚酸異丙酯
其他 十六酸-1-甲基乙基酯；十六酸異丙酯；十六烷酸異丙酯
英文名稱： Isopropyl palmitate
其他英文名稱： Isopropyl hexadecanoate
產(chǎn)品規(guī)格： AR，98%
包 裝： 100毫升/500毫升
CAS號：142-91-6
C19H38O2=298.51
級別：AR
含量：≥98.0%
折光率：1.437～1.439
比重：0.852～0.857
性狀：無色透明油狀液體。無臭。溶于乙醇、礦物油和固定油,不溶于水。相對密度(d2020)0.850～0.869。熔點8～15℃。沸點160℃(0.22kPA)。折光率(n20D)1.437～1.440
用途：生化研究?；瘖y品。制備外用藥劑的油性原料
保存：RT
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