培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途: 利用根據(jù)線蟲在固定時(shí)體內(nèi)各器官的氫離子濃度和生理狀態(tài)不同,可區(qū)分線蟲和植物組織,游離的線蟲經(jīng)過染色后內(nèi)部器官染成不同顏色,便于觀察識(shí)別,主要用于觀察游離線蟲的染色 注意事項(xiàng): 主要由次甲藍(lán)、乙醇、蒸餾水等組成 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
裂褶菌AP-1μ2抗體Human LRRC8C ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒
柱形孢鏈霉菌肥大膜抑制性受體Allergin1抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病腦鈉通道蛋白1抗體Human LSAMP ELISA Kit小鼠胰島受體β(ISR-β)免疫試劑盒
土庫(kù)曼野野村氏菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體Human LRWD1(Leucine-rich repeat and WD repeat-containing protein 1) ELISA Kit小鼠胰島降解(IDE)免疫試劑盒
黑木耳三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠胰島(INS)免疫試劑盒
黃桿菌甲胎蛋白抗體Human LSM1 ELISA Kit小鼠原激活肽(TAP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體Human LRRC29 ELISA Kit小鼠-1(trypsin-1)免疫試劑盒
檸檬形克勒克酵母ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體Human LRRC41 ELISA Kit小鼠(trypsin)免疫試劑盒
球孢白僵菌肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠胰α淀粉(AMY2A)免疫試劑盒
Rhizobium alkalisoli性鈣調(diào)蛋白3抗體Human LRRC47 ELISA Kit小鼠一氧化碳血紅蛋白(HbCO)免疫試劑盒
產(chǎn)腸大腸埃希氏菌磷化CD156b抗體Human LRRC4C ELISA Kit小鼠一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒
產(chǎn)朊假絲酵母乙脫氫5抗體Human LSG1 ELISA Kit小鼠一氧化氮(NO)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌乙脫氫6抗體Human LRRC52 ELISA Kit小鼠葉(FA)免疫試劑盒
假單胞菌溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移5抗體Human LRRC18 ELISA Kit小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體Human LRCH3 ELISA Kit小鼠氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)免疫試劑盒
灰樹花G25免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體Human LRRC20 ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒
檸檬球菌Citricoccus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC胞外超氧化物歧化試劑盒3-乙南美楝屬二酯
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胞漿型磷脂A2-α試劑盒乙?;涿牢恫軦
傘枝犁頭霉Absidia│corymbifera 質(zhì)量規(guī)格:BR包蟲抗體IgG elisa試劑盒羽扇烯
線蟲活體染色液(多色藍(lán)法)曲拉通x-100
其他乳化劑OP-10;乳化劑TX-10;OP乳化劑
英文名稱:Triton x-100
其他英文名稱:Polyethylene glycol tert-octylphenyl ether;tert-Octylphenoxy poly(oxyethylene)ethanol;Octoxinol
產(chǎn)品規(guī)格:CP
包裝:500毫升
產(chǎn)品規(guī)格:試劑級(jí)
包裝:500毫升
CAS號(hào):9002-93-1
分子式:t-Oct-C6H4-(OCH2CH2)9-10OH
級(jí)別:CP
密度(20℃) :≥0.98g/ml
堿度試驗(yàn):合格
霧點(diǎn):75~85℃
C34H62O11=647
級(jí)別 :Reagent Grade
Peroxides:None
pH (5%, Water) @25C:6.0~8.0
性狀:無(wú)色或幾乎無(wú)色透明粘稠液體。能溶于水、甲、二甲和乙。沸點(diǎn):270℃;熔點(diǎn):6℃;折光率:1.491。
用途:生化研究。氣相色譜固定液(高使用溫度190℃,溶劑為、、二氯、甲)分離分析烴類化合物、含氧化合物(、酯、)、堿性和中性含氮化合物、硫。用途廣泛的非離子表面活性劑,在溫和的變性條件下用于恢復(fù)膜組分
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