操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱:細(xì)胞核染料DAPI
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:10mg|1mg
發(fā)貨周期:1~3天
DAPI 是一種藍(lán)色核酸染料,優(yōu)先染dsDNA,DAPI 表現(xiàn)為可集中結(jié)合在DNA 雙鏈的AT 小溝,結(jié)合后的DAPI 熒光會發(fā)生20 倍增強(qiáng)。同時,DAPI 也可以結(jié)合RNA,與DNA 不同,一般認(rèn)為DAPI 結(jié)合于RNA 的AU 區(qū)。DAPI/RNA 的復(fù)合體(500nm)有比DAPI/dsDNA復(fù)合體(460nm)更長的熒光波長。DAPI 是一種常用的多色熒光技術(shù)中的核復(fù)染劑。他的藍(lán)色熒光可以與綠色、紅色、橙黃色探針形成鮮明對比。 |
儲存:4℃,避光
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
波棱英文名稱: C12E8Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝100ml
博落回(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium florideFas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝25ml
薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium stearateF-box蛋白21抗體包裝100g
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cedar wood oilGATA結(jié)合蛋白1伴侶蛋白抗體包裝25g
補(bǔ)骨脂定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cerium(III) sulfate, octahydrate胎球蛋白B/Fetuin β抗體包裝5g
補(bǔ)骨脂二氫黃;補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chromium (III) oxide叉頭蛋白O1抗體包裝25g
補(bǔ)骨脂二氫黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cobalt (II, III ) oxide鐵蛋白重鏈抗體包裝5g
補(bǔ)骨脂酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cobaltous acetate, tetrahydrate類固受體復(fù)合物蛋白FKBP5抗體包裝5g
補(bǔ)骨脂寧;補(bǔ)骨脂異黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cobaltous powder纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體包裝100g
補(bǔ)骨脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper powder纖維生長因子結(jié)合蛋白2抗體包裝25g
布渣葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(II) carbonate basic肌動蛋白結(jié)合蛋白Fascin3抗體包裝25mg
菜油甾英文名稱: Copper(II) oxide結(jié)構(gòu)特異性核FEN1抗體包裝100g
參麥提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(II) pyrophosphateFAM61B蛋白抗體包裝500g
蠶沙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Copper(II) tartrate, trihydrateFAM63A蛋白抗體包裝100mg
蒼耳亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: dADP上皮分泌型FAM3C蛋白抗體包裝500mg
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)嗜肺軍團(tuán)菌抗原試劑盒去基雛葉龍膽;Tetrahydrox
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品視黃elisa試劑盒羥基異亮;4-Hydroxyisol
0大腸桿菌克菌株Escherichia coli 0 質(zhì)量規(guī)格:>99%,VEGFR 抑制劑,培養(yǎng)級食欲受體試劑盒去氫松香;Dehydroabietlc
細(xì)胞核染料DAPI芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-蘇
其他Fmoc-O-叔丁基-L-蘇;N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-蘇;N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-蘇
英文名稱:FMOC-O-tert-Butyl-L-threonine
其他英文名稱:Fmoc-Thr(tBu)-OH
產(chǎn)品規(guī)格:特純,98%
包裝:1克/5克/25克/100克
CAS號:71989-35-0
C23H27NO5=397.46
級別:Purum
含量:≥98.0%
比旋光度:+16±1°(c = 1% in ethyl acetate)
熔點(diǎn):131-134℃
性狀:粉末
用途:生化研究
保存:2~8℃