培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
用途:
肌纖維、纖維素的染色,尤其適用于橫紋肌/平滑肌染色
注意事項(xiàng):
染色液采用化學(xué)氧化法使其成熟,但保存時間短,染色力同自然氧化法。橫紋肌的橫紋、纖維素、胞核、紅細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)纖維呈深藍(lán)色,膠原纖維、軟骨呈棕紅色。
儲存條件:室溫,避光,6個月
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Prosapogenin CP6英文名稱: MagnesonII白介16抗體包裝1g
Raddeanoside 20英文名稱: Ferron抑制βB/Inhibin β B抗體包裝250mg
Sapindoside A英文名稱: 3-Methyl-2-benzothialinone白介11抗體包裝1g
Smyrindioloside英文名稱: Miglitol白介22受體抗體包裝5g
Thonningianin A英文名稱: Miglitol白介26抗體包裝1g
Tokinolide B英文名稱: 1-Naphtholphthalein白介-17D抗體包裝25g
Triptonine B英文名稱: Dapoxetine hydrochloride環(huán)指蛋白217抗體包裝5g
α-倒捻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dapoxetine hydrochloride白介2抗體(人)包裝1g
α-蒎烯英文名稱: Fast Black K Salt白介-23受體抗體包裝500mg
α-乳香英文名稱: Amido black 10B胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3抗體包裝5g
α-石竹烯英文名稱: Naltrexone hydrochloride白介6受體β抗體IL-6Rβ包裝1g
α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triphenylarsine oxide干擾-gamma受體1抗體包裝25g
α-香附(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone白介1α前肽/IL-1α前肽抗體包裝5g
α-常春藤皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aloin B整合α11抗體包裝1g
β,β-二基烯酰阿卡寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Arctigenin 4'-O-β-gentiobioside胰島生長因子樣家族成員2抗體包裝5g
弗氏志賀菌Shigella│flexneri 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR利什曼原蟲試劑盒L-精;L(+)-Arginine
曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,可用于培養(yǎng)利尿肽試劑盒積雪草;Asiatic acid
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR李斯特菌抗體試劑盒金雀花堿;Cytisine
Mallory PTAH染色液(化學(xué)氧化法)羧肽A(牛胰)
英文名稱:Carboxypeptidase A from bovine pancreas
其他英文名稱:Carboxypolypeptidase; Peptidyl-L-amino-acid hydrolase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,50u/mg
包裝:500U
CAS號:11075-17-5
分子量:~35 kD
級別:BR
類型:Type I
活力:~50 units/mg protein
活力定義:One unit will hydrolyze 1.0 μmole of hippuryl-L-phenylalanine per min at pH 7.5 at 25 ℃
性狀:灰褐色懸浮液
用途:生化研究。羧肽A能釋放除脯、羥脯、精和賴之外的所有C末端基,更易于水解具有芳香族側(cè)鏈和大脂肪側(cè)鏈的羧基端基
PH:7.9
等電點(diǎn)PI:6.0
Chymotrypsin and trypsin:≤0.02%
產(chǎn)品描述:Catalyzes hydrolysis of the basic amino acids lysine,arginine and ornithine from the C-terminal position in polypeptides.A solution in 100mM sodium chloride.PMSF treated to inhibit tryptic and chymotryptic activities.
級別:Chromatographically purified
活力:≥170units/mg
性狀:粉末。以原形式存在于生物體內(nèi)
性狀:粉末或膠體或液體,A solution in 100mM sodium chloride。以原形式存在于生物體內(nèi)
用途:生化研究??蓪R恍缘貜碾逆湹?/span>C端開始逐個降解,釋放出游離基的一類肽鏈外切。羧肽B只水解以堿性基(如精和賴)為C末端殘基的肽鍵。
保存:-20℃