實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
Human cyclophilin A,CyPA ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)AMulti-class antibodies: 48T
Smad3 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
Apaf-1(Human apoptosis protease activating factor-1) ELISA Kit 人凋亡蛋白激活因子1 96T
NOX5 還原型Ⅱ氧化5/煙酰胺腺二核苷磷抗體 0.2ml
Phospho-Bad (Ser155) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 0.1ml
Smad3 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78Multi-class antibodies: 48T
PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HEY2 轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 0.2ml
Des ELISA Kit 大鼠結(jié)蛋白 96T
procollagen type IIA Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體 0.2ml
C9orf37 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框37抗體 0.2ml
PLAUR 尿激型纖溶原激活因子受體抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser226) 磷化糖皮質(zhì)受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ASIC1/BNaC2 敏感離子通道1抗體 0.1ml
HSP-20/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白-20抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.3ml
PIM1/FITC 熒光標(biāo)記前病毒整合位點(diǎn)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
乙型肝炎病毒C型染料法熒光定量PCR試劑盒普通變形菌(暫無(wú))種屬: Proteus vulgaris提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 內(nèi)切PvuⅠⅡ, Type strain,培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂 :蛋白胨10.0 g,牛肉提取物 3.0 g,NaCl 5.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 7.0生長(zhǎng)條件: 37℃,好氧存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
香菇種屬: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 食用、藥用培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;礦物油法;定期移植法
嗜鹽四聯(lián)球菌(醬油片球菌)種屬: Tetragenococcushalophilus安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 142生長(zhǎng)條件: 30℃
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus│pumilus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 性蛋白培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒甲基納迪克酐 95%2-羥基-3-萘甲 97%硬脂鉛
26S蛋白體非ATP調(diào)節(jié)亞基11(PSMD11)ELISA試劑盒硬脂甲酯 CP,45%(GC)楊甲酯 CP,98%硫鉛(>99%,BC)
26S蛋白體(26S PSM)ELISA試劑盒2-吡啶甲 98%楊 AR,99.5%硫鉛(>98%,BR)
25羥基維生D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒二鈉 99%楊 CP,99.0%紅色氧化鉛(>95%,BC)
25羥基維生D3(25 HVD3)ELISA試劑盒錫鈉 CP,53.67% SnO2楊 ACS, ≥99.0% 醋高鉛(>95%,BC)
25羥基維生D2(25 HVD2)ELISA試劑盒癸二 CP,98.0%楊 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%鉛粉(>99%,BC)
20S蛋白體(20SP)ELISA試劑盒三丁酯 CP楊 用于植物培養(yǎng),≥99 %式碳鉛(>99%,BR)
2,3-二甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒三鹽鹽 98%考馬斯亮藍(lán)G250 AR雷氏曼著色劑
2,3-二甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒酯 98%考馬斯亮藍(lán)G250 AR,無(wú)蛋白來(lái)普霉B 1%溶液
2,3-二甘油(2,3-DPG)ELISA試劑盒三丁酯 >99.0%(T)考馬斯亮藍(lán)G250 70%,用于電泳3,5-二楊鋰(>98%,BC)
2,3Dinor血栓B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒三丁酯 CP,98% ≥98.0% (HPLC)(劇品)無(wú)溴化鋰(>98%,BR)
2 型次核苷脫氫(IMPDH)(IMPDH2)ELISA試劑盒硫代氨基脲 AR,98.5% Standard for GC, ≥99.5% (GC)氟化鋰
1型1-鞘氨受體(S1P1)ELISA試劑盒 分析標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)甲磺酰 AR,99%偏鋰(>98%,BR)
17酮皮質(zhì)類固(17-KS)ELISA試劑盒反-丹 分析標(biāo)準(zhǔn)品T 三合物 CP,98%草鋰(>98%,BR)
17-酮類固(17-KS)ELISA試劑盒二基錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品T 三合物 ACS, 98%硬脂鋰(>98%,BR)
17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒二庚基錫 分析標(biāo)準(zhǔn)品T 三合物 AR,99.0%硫鋰一(分子生物學(xué)級(jí))