詳細(xì)介紹
英文名稱:XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit
產(chǎn)品規(guī)格:500T|1000T
發(fā)貨周期:1~3天
XTT(二甲氧唑黃)是一種類似于MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,活細(xì)胞線粒體中存在與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶,可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲臜。生成的甲月贊能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,不形成顆粒,可直接用酶聯(lián)免疫檢測儀檢測定吸光值。 |
操作方法
1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔(約1×104),置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃,含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 檢測工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小時(shí)。
6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。
結(jié)果分析
1. 細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加XTT 工作液,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加XTT 工作液,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
III型前膠原基末端肽(PⅢNP)elisa試劑盒英文名稱:PⅢNP ELISA KitBcl2相互作用蛋白1抗體(轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白)包裝100g
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DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)elisa試劑盒英文名稱:DNMT1 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5g
芳香乙酰脫乙?;笜拥鞍?/span>2抗體肝核因子1β(HNF1β)LCL161 is an orally bioavailable second mitochondrial-derived activator of caspa
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑硬脂鋁
其他 硬酯鋁;十八鋁;三(十八)鋁;三硬酯鋁;三(十八)鋁;十八鋁鹽
英文名稱: Aluminum tristearate
其他英文名稱: Aluminum stearate;Aluminum octadecanoate;Stearic acid aluminum salt
產(chǎn)品規(guī)格: CP
包裝:250克
CAS號:637-12-7
C54H105O6Al=877.40
級別:CP
水溶解試驗(yàn):合格
性狀:粉末。溶于乙、、松節(jié)油、礦油、氫氧化鈉堿溶液、松節(jié)油、甲、等多種溶劑,幾乎不溶于水。遇強(qiáng)分解成硬脂和相應(yīng)的鹽
用途:生化研究。用于金屬防銹劑的原料、建筑材料的防水劑、油墨的拋光劑、化妝品的增稠劑等。硬脂鋁在涂料中,用作平滑劑及增稠劑,同時(shí)還具有改進(jìn)涂膜觸變性的效果。
保存:RT
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000~0000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)