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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：水貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管
產(chǎn)品貨號：FS-02R6415
產(chǎn)品規(guī)格：48T 0.1PCR管
產(chǎn)品分類：PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Menin/Men1/FITC 熒光標記Menin抑癌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TNF-alpha/FITC 熒光標記壞死因子-α抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Acetyl and phospho-Histone H3(Ac-K9/p-Ser10) 乙?；土谆M蛋白H3抗體 0.1ml
Rabbit Biotin/APC APC標記的兔抗生物抗體IgG 0.1ml
GPR146 G蛋白偶聯(lián)受體146抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Avidin/RBITC 羅丹明標記的兔抗親和 0.1ml
TNF-alpha/FITC 熒光標記壞死因子-α抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit 人組織蛋白抗體Multi-class antibodies： 48T
rInsulin human monoclonal 重單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LMBR1/DIF14 分化相關基因14抗體 0.2ml
GAG(Human glycosaminoglycan) ELISA Kit 人糖胺聚糖ELISA試劑盒 96T
RFC2 復制激活因子C2抗體 0.2ml
phospho-CstF64 (Ser83) 磷化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 0.1ml
rInsulin human monoclonal 重單克隆抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Goat IgM/Bio 生物標記的兔抗羊IgM 0.5ml
GLT8D1 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AF10/MLLT10 髓系、、混合系白血病易位基因10抗體 0.1ml
LH/FITC 熒光標記小鼠抗人促黃體生成單克隆抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗狗IgG 0.1ml
STAT4 /FITC 熒光標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
水貂源性成分核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管豬反狀腺原（rT3）elisa檢測試劑盒
猴趨化因子CCL3樣蛋白1（CCL3L1）elisa檢測試劑盒
豬腦型肌（CKB）elisa檢測試劑盒
猴肝配蛋白A受體10 （EPHA10）elisa檢測試劑盒
猴補體因子H（CFH）elisa檢測試劑盒
猴腦鈉/腦鈉肽（BNP）elisa檢測試劑盒
豬胸苷合成（TS/TYMS）elisa檢測試劑盒
猴神經(jīng)保護因子（CVNPF）elisa檢測試劑盒
猴補體受體2 （CR2/CD21）elisa檢測試劑盒
豬β-促脂（β-LPH）elisa檢測試劑盒
猴神經(jīng)特異性烯醇化（NSE）elisa檢測試劑盒
猴磷脂A2受體1（PLA2R1）elisa檢測試劑盒
豬鞘脂活蛋白原（PSAP）elisa檢測試劑盒
豬心肌肌鈣蛋白I（cTn-I/TNNI3）elisa檢測試劑盒
猴TATA框結(jié)合蛋白相關因子13（TAF13）elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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