詳細介紹
服務流程:
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設計特異性引物和熒光探針(染料法只需設計引物)
2、抽提DNA、RNA,并對RNA進行逆轉(zhuǎn)錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結(jié)果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品(引物、RNA和cDNA)
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:轉(zhuǎn)基因品系油菜RF2 PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
CASPASE-7蛋白免疫共沉淀分析 EPB41L1 100 ul
CASPASE-7蛋白表達定量 ENOPH1 100 ul
細胞CASPASE-8蛋白表達流式細胞儀 ENOX2 100 ul
冰凍切片組織TRAIL 蛋白表達熒光顯微鏡 ENPP4 10 mg
石蠟切片組織TRAIL 蛋白表達熒光顯微鏡 E 10 mg
載玻片細胞TRAIL 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 ENPP6 1 ml
冰凍切片組織TRAIL 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 ENPP5 1 ml
石蠟切片組織TRAIL 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡 ENSA 100 ul
細胞TRAIL 蛋白表達比色法定量 ENTPD2 100 ul
細胞TRAIL 蛋白表達熒光定量 ENTPD4 100 ul
TRAIL 蛋白表達西方雜交分析 ENOX2 100 ul
TRAIL 蛋白免疫共沉淀分析 E 100 ul
TRAIL 蛋白表達定量 ENPP4 100 ul
細胞EGFR 蛋白表達流式細胞儀 ENPP5 100 ul
載玻片細胞EGFR 蛋白表達熒光顯微鏡 ELP4 100 ul
冰凍切片組織EGFR 蛋白表達熒光顯微鏡 EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) 100 ul
轉(zhuǎn)基因品系油菜RF2 PCR試劑盒Halorubrum│sp.分離基物: 沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0212生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Pleurotus│ostreatus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 食用菌培養(yǎng)基: 17生長條件: 15℃存儲條件: 定期移植法
Bacillus│hwajinpoensis分離基物: 生物樣/蘭藻提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 近海細菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│licheniformis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 堿性蛋白酶。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 啤酒下面發(fā)酵。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Erythrobacter│citreus分離基物: 沉積物/深海沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶;培養(yǎng)基: 821生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
熒光假單胞菌種屬: Pseudomonas│fluorescens提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Verticillium│dahliae Kleb.分離基物: 根系提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25-27存儲條件: 定期移植法