詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:動物總DNA/RNA提取試劑盒48T
產品貨號:FS-02R6715
產品規(guī)格:48T
產品分類:核酸提取系列(Et)
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
N-AChR ELISA Kit 大鼠煙型乙酰膽受體Multi-class antibodies: 48T96T
Thymosin Alpha-1 胸腺肽α1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Glypican 6 磷脂酰基醇蛋白聚糖-6抗體 0.2ml
TCC C5b-9 ELISA Kit 大鼠末端補體復合物C5b-9 96T
NSMAF 中性鞘磷脂相關因子抗體 0.1ml
Adrenomedullin 腎上腺髓質抗體(N端20肽) 0.1ml
Thymosin Alpha-1 胸腺肽α1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
SP-A(Human Pulmonary surfatcant-associated protein A) ELISA Kit 人肺表面活性物質相關蛋白AMulti-class antibodies: 48T
HSA 人血清白蛋白單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAX protein Myc基因相關X因子抗體 0.1ml
KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽釋放10 96T
Rbms3 抑癌基因Rbms3抗體 0.1ml
C7orf16 7號染色體開放閱讀框16抗體 0.2ml
HSA 人血清白蛋白單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit human IgG/APC APC標記的兔抗人IgG 0.1ml
Glutathione Transferase zeta 1 谷胱甘肽S轉移ζ1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ALDH1B1 乙脫氫5抗體 0.1ml
Ku-80/FITC 熒光標記DNA修復Ku-80抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/FITC FITC標記的兔抗豚鼠IgG 0.3ml
Phospho-Smad2 (Ser245/250/255)/FITC 熒光標記磷化細胞信號轉導分子SMAD2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
動物總DNA/RNA提取試劑盒48T大鼠基質衍生因子1β(SDF-1β)elisa檢測試劑盒
大鼠蛋白活受體2(PAR2)elisa檢測試劑盒
小鼠線粒體超氧化物歧化2(SOD2)elisa檢測試劑盒
小鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP-1)elisa檢測試劑盒
大鼠前白蛋白(PA/PLB)elisa檢測試劑盒
小鼠多配體聚糖1(SDC1)elisa檢測試劑盒
大鼠突觸體相關蛋白25(SNAP-25)elisa檢測試劑盒
大鼠I型前膠原N端前肽(PINP)elisa檢測試劑盒
大鼠前列腺特異性抗原(PSA)elisa檢測試劑盒
小鼠白介19(IL-19)elisa檢測試劑盒
大鼠孕/孕酮(Pg)elisa檢測試劑盒
大鼠血管內皮酪(TEK)elisa檢測試劑盒
小鼠胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)elisa檢測試劑盒
小鼠磷烯醇式丙酮羧1(PCK1)elisa檢測試劑盒
大鼠多效生長因子(PTN)elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。