詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013381
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
MAP-2/FITC 熒光標記微管相關蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
T7 tag/FITC 熒光標記T7 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS1 整合樣金屬蛋白與1型抗體 0.1ml
Rabbit chicken IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗雞IgM 0.1ml
phospho-Gria2 (Ser880) 磷化谷受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗IgM 0.1ml
T7 tag/FITC 熒光標記T7 tag標簽抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
BECN1/FITC 熒光標記一種抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CK6 細胞角蛋白6抗體 0.1ml
DISC1(disrupted in schizophrenia1)(NT) DISC1 N端抗原 0.5mg
Rabbit IgG heavy chain constant region 兔抗人γ-鏈 0.1ml
Rhesus antibody Rh TRAF7 壞死因子受體相關因子7抗體 0.2ml
GLUR3/FITC 熒光標記谷受體3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
GPD1 甘油三磷脫氫1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD40 錨蛋白重復結構域蛋白40抗體 0.2ml
Integrin Alpha2/CD49b/FITC 熒光標記整合α2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
RPS6/FITC 熒光標記S6核糖體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: K Lancefield培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
米曲霉種屬: Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 研究;。產(chǎn)糖化,淀粉,酒精糖化菌。培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件: 25-28℃,好氧存儲條件: 2-8℃冷藏
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: B 5 V 7...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
黃微球菌種屬: Micrococcus│flavus分離基物: 沉積物/活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株,用于分類學研究。培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
周期依賴性激1(CDK-1)ELISA試劑盒甲 無級, 99.8%乙乙酯 AR,99%聯(lián)芐唑(標準品)
重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒乙基叔丁基 分析標準品乙乙酯 for HPLC, >99.0%(GC)膽紅(標準品)
重組激活基因1(RAG-1)ELISA試劑盒4-叔丁基吡啶 98%甲溶液 AR,含10-15% 甲穩(wěn)定劑膽紅
重去甲腎上腺(NE-B)ELISA試劑盒鄰二甲丁芐酯 分析標準品甲 Standard for GC,>99.9%比伐盧定(TFA)
腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒甲 Standard for GC,≥99.5%(GC)甲 AR,99.5%比馬前列腺/貝美前列
腫瘤相關抗原(TAA)ELISA試劑盒聚氧乙烯月桂 高純級,Brij-35甲 CP,99.5%比馬前列腺/貝美前列(標準品)
腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒2-溴乙 分析標準品甲 AR,無級鹽平陽霉
腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA試劑盒2-溴-5-氟吡啶 99%甲 for HPLC, ≥99.9%硫博萊霉/博來霉/爭光霉
腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒溴代硝 90%甲 農(nóng)殘級, ≥99.9%替佐米/保特佐米
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TSGF)ELISA試劑盒雙(4-)酯 99%甲 ≥99.9%(GC)替佐米(標準品)
腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)ELISA試劑盒2-環(huán)己基溴乙 98%甲 ACS博舒替尼
腫瘤壞死因子誘導基因6蛋白(TNFAIP6)ELISA試劑盒5-溴-2-氟 97%甲 分析標準品,99.9%布地奈德
腫瘤壞死因子相關弱凋亡誘導因子(TWEAK)ELISA試劑盒5-溴-5-硝基-1,3-二惡 98%甲 電子級布地奈德(標準品)
腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)ELISA試劑盒Nα-甲酰-DL-精氨酰-β-萘 97% 甲 ACS 光譜級, ≥99.9%亞葉鈣
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒赫斯特熒光燃料,33258 98%甲 LC-MS,≥99.9%亞葉鈣(標準品)
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體2(TRAIL-R2/DR5)ELISA試劑盒并[e]芘 分析標準品甲 色譜級+, ≥99.9%喜樹
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。