HDAC I型抑制劑(BG45)

操作規(guī)程：

1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)

中文名稱：HDAC I型抑制劑(BG45)

注意事項(xiàng)：

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

黃暗青霉Bacillus pumilus

季也蒙畢赤酵母Rahnella aquatica

叢毛單胞菌Pseudomonas aeruginosa

黃曲霉Achromobacter xylosoxidans

白色短波單胞菌Citrobacter amalonaticus

粉紅單端孢霉Pseudomonas aeruginosa

大腸埃希氏菌Bacillus circulans

球毛殼Paenibacillus phyllosphaerae

傷口埃希菌Citrobacter amalonaticus

莖生擬莖點(diǎn)霉Stenotrophomonas maltophilia

淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種Lactococcus plantarum

許旺酵母屬Lactococcus lactis subsp. cremoris

枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis subsp. subtilis

丁香直絲鏈霉菌Enterococcus mundtii

和緩艾美爾球蟲(LZ株)Streptococcus thermophilus

熒光假單胞菌Lactobacillus plantarum

海芽孢桿菌Bacillus│aquimaris 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumonia 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>95%
HDAC I型抑制劑(BG45)L-半胱鹽鹽無水物

其他L-2-基-3-巰基鹽鹽；L-氫氯半胱無水物

英文名稱：L-Cysteine Hydrochloride Anhydrous

產(chǎn)品規(guī)格：BR,99%

包裝：25克/100克/500克

CAS號：52-89-1

C3H7NO2S•HCl = 157.62

含量：≥99.0%

比旋光度：5.6～8.9°

PH：1.5～2.0

重金屬：≤10ppm

砷鹽：≤1ppm

鐵鹽：≤10ppm

干燥失重：≤1.0%

性狀：結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,強(qiáng)味，無臭，僅有痕量亞硫鹽氣味。它在動(dòng)植物體內(nèi)是各組織細(xì)胞用來防御有害物質(zhì)和增加活力的一種基，也是組成蛋白質(zhì)的20多種基之一，并且是具有活性巰基(-SH)的基

用途：生化研究。NMDA 谷能受體激動(dòng)劑，在高濃度時(shí)，也是AMPA谷能受體激動(dòng)劑

保存：RT，避光