詳細介紹
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
產品屬于:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
GMX1778 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
GMX1778(CHS-828)是NAMPT高效抑制劑,可抑制劑NAD_addition_的生化合成,IC50值小于25nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:200484-11-3 純度:99.65% 分子量:371.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
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NAMPT抑制劑(GMX1778)(CHS-828固紅片劑
其他固紅-萘磺TR片劑;快紅片劑;快紅TR片劑
英文名稱:Fast red TR Tablets
其他英文名稱:Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt tablets
產品規(guī)格:高純
包裝:5片/25片
CAS號:51503-28-7
C17H13O6N2O6S2Cl=440.88
級別:High purity grade
含量:5/100mg tablets
Abs.@Lambda Max A (2 tab/1L Water):>1.4
Abs.@Lambda Max B (2 tab/1L Water):>0.5
灼燒殘渣:≤0.2%
性狀:綠色或黃綠色金屬光澤結晶,為品紅和副品紅(PArArosAnilinE)鹽鹽或乙鹽的混合物。200℃以上分解。溶于乙和戊,微溶于水。溶于酒精呈紅色;溶于熱水呈紅紫色,遇濃硫呈黃棕色,稀釋后幾乎無色;水溶液加氫氧化鈉液呈帶有紅色沉淀的幾乎無色的液體。大吸收波長(乙中)543nm(ε93000)。有毒
用途:生化研究。用于配制席夫試劑檢測醛類,用于萃取光度法測定某些根離子及金屬離子。也用于光度法檢測溴,亞硝鹽和二氧化硫。用作極譜分析中的極大抑制劑。還用作生化分析的核染料,為強的核染料。能使粘朊、彈性組織和嗜品紅的顆粒染色。神經的核染色;學中用以鑒別結核桿菌;分析化學中配制席夫試劑檢驗醛類。用溴鹽滴定的氧化還原指示劑
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