產(chǎn)品屬于:
商品介紹:
本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。 細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè),可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。
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TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 488)可以用來(lái)檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡晚期過程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入Alexa Fluor 488-12-dUTP,從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
Alexa Fluor 488染料穩(wěn)定性更高,信號(hào)更強(qiáng),從而使標(biāo)記物更亮,抗淬滅能力更強(qiáng)。
試劑盒組份:
5×Equilibration Buffer ——————————750μl
Alexa Fluor 488-12-dUTP Labeling Mix————100 μl
Recombinant TdT Enzyme ——————————20 μl
Proteinase K(2 mg/ml)——————————— 40 μl
DNase I (1 U/μl)————————————— 5μl
10×DNase I Buffer with MgCl2—————— 100 μl
儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT3)elisa試劑盒英文名稱:NT3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64B抗體包裝100g
神經(jīng)型一氧化氮合(NOS1)elisa試劑盒英文名稱:NOS1 ELISA Kit組蛋白H3-K9基轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)elisa試劑盒英文名稱:NRP1 ELISA Kit趨化樣因子超家族成員6抗體包裝5g
神經(jīng)纖維2(NF2)elisa試劑盒英文名稱:NF2 ELISA Kitcornichon樣蛋白抗體包裝100g
神經(jīng)調(diào)節(jié)4(NRG4)elisa試劑盒英文名稱:NRG4 ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白1抗體包裝25g
神經(jīng)調(diào)節(jié)1(NRG1)elisa試劑盒英文名稱:NRG1 ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白2抗體包裝500g
神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)elisa試劑盒英文名稱:NPY5R ELISA KitRas激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體包裝1g
神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)elisa試劑盒英文名稱:NPY2R ELISA Kit分裂周期2樣蛋白激5抗體包裝250mg
神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)elisa試劑盒英文名稱:NPY1R ELISA KitCD20樣蛋白抗體(造血干4跨膜蛋白3)包裝10MG
神經(jīng)肽S(NPS)elisa試劑盒英文名稱:NPS ELISA Kit周期蛋白依賴性激CABLES1抗體包裝25g
神經(jīng)肽FF(NPFF)elisa試劑盒英文名稱:NPFF ELISA Kit分裂周期相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)elisa試劑盒英文名稱:NEF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體包裝5mg
神經(jīng)介S(NMS)elisa試劑盒英文名稱:NMS ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體包裝1ml
神經(jīng)介B(NMB)elisa試劑盒英文名稱:NMB ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160抗體包裝100mg
神經(jīng)激肽B(NKB)elisa試劑盒英文名稱:NKB ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體包裝25mg
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體3試劑盒澤瀉 B;Alisol B
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體2試劑盒澤瀉 A;Alisol A
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1試劑盒正丁; Butylamine
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 488)乙銀
其他 醋銀
英文名稱: Silver acetate
其他英文名稱: Acetic acid silver salt
產(chǎn)品規(guī)格: CP,99%
包裝:25克
CAS號(hào):563-63-3
C2H3AgO2=166.91
級(jí)別:CP
含量:≥99.0%
硝鹽:≤0.05%
銅、鉍、鉛:合格
澄清度試驗(yàn):≤6號(hào)
硝不溶物:≤0.03%
鹽不沉淀物:≤0.05%
性狀:到微灰色閃光針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。對(duì)光敏感。易溶于稀硝,溶于100份冷水、35份沸水。相對(duì)密度3.26。有刺激性。
用途:生化研究。在分析中用以除去鹵。液的氧化
保存:RT,避光
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。