詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:沙門氏菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013549
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit 人泛蛋白Multi-class antibodies: 48T
SNAP-25 突觸相關蛋白25抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Bio 生物標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
C3a ELISA Kit 大鼠補體片斷3a 96T
NCS1 神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體 0.2ml
BST1 骨髓基質(zhì)干細胞抗原1抗體 0.2ml
SNAP-25 突觸相關蛋白25抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠AMulti-class antibodies: 48T
OPGL/ODF 骨保護蛋白配體抗體(破骨細胞分化因子)Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh ICOS/CD278 誘導協(xié)同刺激分子CD278抗體 0.2ml
PAI ELISA Kit 大鼠纖溶原激活物抑制因子 96T
Protamine 2 魚精蛋白2抗體 0.2ml
C17orf74 17號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml
OPGL/ODF 骨保護蛋白配體抗體(破骨細胞分化因子)Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey rabbit IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCHFR GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Artemin Artemin抗體 0.2ml
CD54/ICAM-1/Biotin 生物標記細胞間粘附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗猴IgG 0.3ml
PKC alpha/FITC 熒光標記蛋白激C α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
沙門氏菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium sp提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
粘質(zhì)沙雷氏菌種屬: Serratia│marcescens提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: quality control strain培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
地衣芽孢桿菌種屬: Bacillus│licheniformis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 598生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)ELISA試劑盒乙二叔丁 99%氟化,二 CP軟海綿(>95.0%,BC)
β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒乙二單己 98%氟化,二 AR軟海綿鈉(>95.0%,BC)
β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒烯異辛酯 >99.0%(GC)氟化,無 GR,粉末鄰二甲酐(>98%.BC)
β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒乙二丁 CP,98.5%鈉 GR,99.5%結(jié)晶碳(>98%,BR)
β羥丁(β-OHB)ELISA試劑盒烯羥酯 97%氟化鈉 99.99% metals basis焦(>97%,BC)
β葡萄糖苷(βGD)ELISA試劑盒甲基烯羥乙酯 98%氟化鈉 分析標準品,99.93%鎢二(>98%,BR)
β葡萄糖苷(β-glucosidase)ELISA試劑盒甲基烯羥乙酯 96%氟化鈉 SP對甲磺酰(>98%,BR)
β葡糖苷(β-glucosidase)ELISA試劑盒硫羥 CP,97.0%氟化鈉 PT硫奎寧合物(>98%,BR)
β內(nèi)酰抑制劑(BLI)ELISA試劑盒烯羥乙酯 97%(含200-300ppmMEHQ穩(wěn)定劑)氟化鈉 ACS, ≥99%鈉(> 98%,BC)
β內(nèi)酰(β-lactamase)ELISA試劑盒正己 AR,97%氟化鈉 AR,98%次鈉溶液
β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒甲基烯羥酯 97%氟化鈉 昆蟲培養(yǎng)級, ≥99%氫二鈉十二(>98%,BR)
β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒異辛 AR,97%縮節(jié) 分析標準品鎢鈉(>98%,BC)
β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒異辛 for HPLC, >97% (GC)縮節(jié) 98%硬脂鈉(>95%,BR)
β萘酚(β-naphthol)ELISA試劑盒異 Standard for GC,>99%(GC)阿斯巴甜 98%硫代硫鈉無(>98.5%,BC)
β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒異 >98.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)1,2,3,4-丁四羧 99%Sulfo NHS LC Biotin
β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)ELISA試劑盒異 CPDL-蘋果 CP,99%Sulfo NHS SS Biotin
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。