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詳細介紹
英文名稱：One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
產品規(guī)格：20次|50次
發(fā)貨周期：1～3天
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于經過固定和洗滌的細胞或組織，只要經過一步染色反應，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測到呈現綠色熒光的凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 |
試劑盒組份：
TdT酶——————————40μl
熒光標記液————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)————500μl
細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實際上大多數情況下所謂的FITC即為fluorescein。
本試劑盒有如下優(yōu)點。
(1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色明亮，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。
(3)快速：僅需約1-2個小時即可完成。
(4)方便：只需一步染色反應，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進行多步操作。
(5)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發(fā)現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，最好同時檢測多個凋亡指標。
儲存條件：-20℃。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
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戊糖素(Pentosidine)elisa試劑盒英文名稱：Pentosidine ELISA Kit磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體包裝5g
激活素受體相互作用蛋白1抗體白介素6(IL6)RTA-408 是一種抗氧化炎癥調節(jié)劑 (AIM)，可激活 Nrf2 并抑制一氧化氮 (NO)。RTA-408 通過抑制 STING 依賴的
一步法TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)朱砂蓮甲素
其他 大黃素；1,3,8-三羥基-6-甲基蒽醌；瀉素；2-甲基-4,5,7-三羥基蒽醌；6-甲基-1,3,8-三羥基蒽醌；瀉鼠李樹皮
英文名稱： Emodin
其他英文名稱： 1,3,8-Tri?hydroxy-6-methyl?anthra?quinone；6-Methyl-1,3,8-tri?hydroxy?anthra?quinone；Emodol；Frangula-emodin
產品規(guī)格： AR，98%
包 裝： 1克/5克/25克/100克
產品規(guī)格： 分析標準品，98%
包 裝： 20毫克
CAS號：518-82-1
C15H10O5=270.24
級別：AR
級別：分析標準品
含量：≥98.0%(HPLC)
性狀：橙色針狀結晶。溶于乙醇，略溶于、苯，不溶于水。溶于苛性堿水溶液、碳本酸鈉水溶液，氨溶液中顯櫻紅色。熔點：256-257℃
用途：生化研究。抑制NF -κB活化及粘附分子的表達。酪蛋白激酶2（CK2的）抑制劑
保存：2～8℃
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
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