詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:托拉斯假單胞菌PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013400
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
ProGRP(Human pro-gastrin-releasing peptide) ELISA Kit 人胃泌釋放肽前體Multi-class antibodies: 48T
Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MARCH3 膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit 人吡哆/吡哆醇B6磷 96T
RNF36 環(huán)指蛋白36抗體 0.2ml
SIRP Alpha 信號調(diào)節(jié)蛋白α抗體 0.2ml
Syndecan-2 多配體蛋白聚糖2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人壞死因子βMulti-class antibodies: 48T
Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/HRP 辣根過氧化物標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒緩激肽 96T
RAB38 G蛋白結(jié)合蛋白RAB38抗體 0.2ml
phospho-CREB-1(Ser142) 磷化CREB-1抗體 0.1ml
Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體(眼鏡蛇)Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse IgM/PE PE標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
GNRHR2 促性腺釋放受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Annexin A8 膜粘連蛋白8抗體 0.1ml
IL-31RA/CRL3/FITC 熒光標記白介31受體a抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG/Cy7 Cy7標記的兔抗人IgG 0.1ml
RGS2/FITC 熒光標記G蛋白信號轉(zhuǎn)導調(diào)節(jié)因子2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
托拉斯假單胞菌PCR試劑盒哈氏弧菌種屬: Vibrio│harveyi提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0223生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
宇佐美曲霉種屬: Aspergillus│usamii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
巴拿馬沙門氏菌種屬: Salmonella│panama提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 1,9,12 l,v 1,5培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法
桔灰青霉種屬: Penicillium│aurantiogriseum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: citrinin培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
血栓A2(TX-A2)ELISA試劑盒十七甲酯 分析標準品二乙酰一肟 AR唑
血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒N-甲基-N-基硅三氟乙酰 GC,≥98.5%二乙酰一肟 >98.0%(GC)(標準品)
血清總補體(CH50)ELISA試劑盒3-甲基環(huán)己 99%氫 AR,≥47.0%鹽金剛乙
血清/血清(ST)ELISA試劑盒2-甲基-3- 分析標準品鈉 80%(劇品)地拉羅司,去鐵斯若
血清淀粉樣蛋白P(SAP)ELISA試劑盒(-)-薄荷 Standard for GC ,≥99.5% (GC)間溴氟 99%地拉羅司(標準品)
血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒反式-4-甲氧基-3--2-酮 97%三氧化二銻 SP利
血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)ELISA試劑盒桑色 Indicator三氧化二銻 99.99% metals basis利(標準品)
血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒山崳甲酯 分析標準品銻粒 99.999% metals basis,beads,1-6 mm那韋(標準品)
血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒山崳甲酯 85%銻粒 99.99% metals basis韋
血清白蛋白(HSA)ELISA試劑盒甘油單油酯 99%銻粒 99.9999% metals basis羅格
血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激2(SGK2)ELISA試劑盒無溴化鎂 anhydrous, powder, 99.995%高純 67:33 混合鹽熔劑 99.98%,33%焦鋰67%偏羅格列酮(標準品)
血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激2(GSK2)ELISA試劑盒無溴化鎂 98%高純 12:22 混合鹽熔劑 99.98%,35.3 %焦鋰64.7 %馬來羅格列酮
血凝(HA)ELISA試劑盒戊甲酯 99%銅粉 99.9% metals basis,200目馬來羅格列酮(標準品)
血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒戊甲酯 分析標準品, ≥99.8% (GC)鋰 99%降鈣;醋鮭魚降鈣
血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒甘露 ≥99.9999% metals basis鋰 99.99% metals basis塞卡替尼
血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒甘露 分析標準品,>99.9999%偏鋰 ≥99.99%塞克硝唑