PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）

商品介紹：

產(chǎn)品屬于：

培養(yǎng)操作步驟：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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鋅指蛋白423抗體榆生離褶傘SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞
PKC抑制劑（NSC305787 hydrochloride）安替比林

其他 安替吡啉；替比林；1,5-二甲基-2-基-3-吡唑啉；非那宗；二基吡唑；2,3-二甲基-1-基-3-吡唑啉-5-

英文名稱(chēng)： Antipyrine

其他英文名稱(chēng)： Phenyl dimethylpyrazolone；1,2-Dihydro-1,5-dimethyl-2-phenyl-3H-pyrazol-3-one；2,3-Dimethyl-1-phenyl-3-pyrazolin-5-one

產(chǎn)品規(guī)格： CP

包　　裝： 100克/500克

CAS號(hào)：60-80-0

C11H12N2O=188.23

級(jí)別：CP

熔點(diǎn)：110～113℃

水溶解試驗(yàn)：合格

水分：≤1.0%

灼燒殘?jiān)?/span>≤0.15%

重金屬：≤0.002%

性狀：片狀結(jié)晶或粉末。微有苦味。1G溶于不超過(guò)1ml水、1.3ml乙、1ml。水溶液對(duì)石蕊呈中性。相對(duì)密度(d204)1.19。熔點(diǎn)111～113℃。沸點(diǎn)319℃。低毒,半數(shù)致死量(大鼠,經(jīng)口)1800mG/kG。有刺激性。

用途：生化研究。硝、亞硝及碘的分析試劑。測(cè)定能形成絡(luò)合陽(yáng)離子的元(如鉍、錫、銻和汞等)。重量分析測(cè)定鈦。

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