詳細介紹
中文名稱:細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)
英文名稱:Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
產品規(guī)格:20 rxn
發(fā)貨周期:1~3天
Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒是用FITC標記了的Annexin V作為探針,來檢測細胞早期凋亡的發(fā)生,可用熒光顯微鏡、流式細胞儀或其他熒光檢測設備進行檢測。 其檢測原理為:在正常的活細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphotidylserine,PS)位于細胞膜的內側,但在早期凋亡的細胞中,PS 從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面,暴露在細胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ(膜聯(lián)蛋白-V)是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力結合??赏ㄟ^細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。 |
另外,本試劑盒中還提供了碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)用來區(qū)分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞。PI是一種核酸染料,它不能透過正常細胞或早期凋亡細胞的完整的細胞膜,但可以透過凋亡晚期和壞死細胞的細胞膜而使細胞核染紅。因此,將Annexin V與PI聯(lián)合使用時,PI 則被排除在活細胞(Annexin V-/PI-)和早期凋亡細胞(Annexin V+/PI-)之外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被FITC 和PI 結合染色呈現(xiàn)雙陽性(Annexin V+/PI+)。
儲存條件:4℃,有效期一年。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數(shù)情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
天冬酰胺內肽酶(LGMN)elisa試劑盒英文名稱:LGMN ELISA Kit軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體包裝5g
天冬酰胺合成酶(ASNS)elisa試劑盒英文名稱:ASNS ELISA Kitβ-酪蛋白抗體包裝100g
天冬轉酶2(AST2)elisa試劑盒英文名稱:AST2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框63抗體包裝25g
天冬轉酶(AST)elisa試劑盒英文名稱:AST ELISA Kit4號染色體開放閱讀框52抗體包裝1g
套膜蛋白(iNV)elisa試劑盒英文名稱:iNV ELISA Kit4號染色體開放閱讀框40抗體包裝5g
糖原磷化酶M(PYGM)elisa試劑盒英文名稱:PYGM ELISA KitCullin3抗體包裝1g
糖原磷化酶L(PYGL)elisa試劑盒英文名稱:PYGL ELISA Kit分裂周期同源蛋白40抗體包裝5g
糖原磷化酶B(PYGB)elisa試劑盒英文名稱:PYGB ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白106抗體包裝100g
糖原合酶激酶3α(GSK3α)elisa試劑盒英文名稱:GSK3α ELISA Kit染色質修飾蛋白1A抗體包裝25g
糖皮質激素受體β(GRβ)elisa試劑盒英文名稱:GRβ ELISA Kit葉綠體伴侶蛋白抗體(蘋果)包裝100g
糖皮質激素受體α(GRα)elisa試劑盒英文名稱:GRα ELISA Kit分裂周期蛋白20B抗體包裝25g
糖抗原125(CA125)elisa試劑盒英文名稱:CA125 ELISA Kit周期調控蛋白D1抗體包裝100ml
碳酐酶Ⅸ(CA9)elisa試劑盒英文名稱:CA9 ELISA Kit周期蛋白B1結合蛋白1抗體包裝25ml
碳酐酶Ⅱ(CA2)elisa試劑盒英文名稱:CA2 ELISA Kit周期調控因子14A抗體包裝500ml
碳酐酶Ⅰ(CA1)elisa試劑盒英文名稱:CA1 ELISA Kit第七號染色體開放閱讀框12抗體包裝1g
膠紅酵母Rhodotorula│mucilaginosa 質量規(guī)格:效價測定組蛋白H2b試劑盒澤瀉A-24-醋酯;Alisol A
白鱗蘑菇Agaricus│bernardii Quél. 質量規(guī)格:>750ug /mg,USP,培養(yǎng)級組試劑盒棕櫚酯;Methyl hexadec
深海海旋菌Thalassospira│profundimaris 質量規(guī)格:含量測定足標記蛋白/足盂蛋白試劑盒左旋千金藤啶堿;L-Stepholidi
細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)乙酰
其他乙酰鈉鹽
英文名稱:Acetyl coenzyme A sodium salt
其他英文名稱:Acetyl CoA
產品規(guī)格:BR,93%
包裝:10毫克/5毫克/50毫克
CAS號:102029-73-2
C23H38N7O17P3S=809.57
級別:BR
含量:≥93%
溶解度(solubility):H2O,100mg/ml
適作用溫度30℃~60℃
使用方法:測活時,用10mM檸檬鈉緩沖液(PH5.7)溶解凍干粉末
性狀:黃色粉末,黑曲霉提取。分子量:15.4~16萬KDa(SDS-PAGE中約80KDa,等電點4.6)。一種能氧化葡萄糖生成葡萄糖的氧化還原酶。易溶于水,*不溶于、丁、吡啶、甘油、乙二等有機溶劑,50%酮、66%的甲能使其沉淀?;瘜W物質EDTA、KCN、NaF不影響其酶活性,但酶活性受AgCL(氯化銀)、肼等影響而使酶活性降低
用途:生化研究。該酶對β-D-葡萄糖表現(xiàn)很高的專一性。食品工業(yè)上用于蛋品加工的脫糖,防止其褐變。飲料、果汁、罐頭及干燥食品方面用于脫氧,延長保藏期。亦可與過氧化氫酶配合,用于食品防腐和葡萄酶法分析等。在醫(yī)學上用作尿糖和血糖試劑。
保存:-20℃
操作規(guī)程:
1、在96孔板加入細胞00μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入00微升5000~0000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)