化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | A01X1970 | 主要用途 | 僅供科研實驗 |
| 組織來源 | 眼角膜組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
詳細介紹
小鼠角膜上皮細胞
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
傳代特性：可傳1-2代左右
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：小鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。其主要功能如下：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能，分三層細胞層，外層即是上皮細胞；②角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng)；③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段，常用于研究細胞代謝產(chǎn)物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。
一、細胞基本屬性
細胞名稱 | 小鼠角膜上皮細胞 | 商品貨號 | A01X1970 |
組織來源 | 眼角膜組織 | 種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
原代細胞分離培養(yǎng)的思路：
取材--分離--培養(yǎng)--鑒定
首先將組織從機體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細胞繁殖到一定系數(shù)后進行細胞鑒定。
實驗步驟：
一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。
二、在超凈工作臺中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開顱腔后取出全腦,放在盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。
三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。
四、用細解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。
五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。
六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。
七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。
八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。
九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。
十、靠近底部的紅細胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。
加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過夜所制備的細胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠嗅鞘細胞 | CTLA4 IG-24 細胞專用培養(yǎng)基 |
結(jié)蛋白單克隆抗體 | 堿性磷（AP）標記的膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體 |
E14 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的白介33抗體 |
Duck embryo 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的磷化細胞核因子抗體 |
DU145 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的KLHDC8A蛋白抗體 |
DT40 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 |
DRG 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的α紅細胞分化相關(guān)因子抗體 |
DLD-1 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的MED6蛋白抗體 |
DI TNC1 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的GTP結(jié)合蛋白4抗體（慢性腎功能衰竭蛋白） |
DAUDI 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的甘露聚糖結(jié)合凝集絲氨肽1抗體 |
DAMI 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的HORMAD1蛋白抗體 |
CX-1 細胞專用培養(yǎng)基 | 小鼠角膜上皮細胞堿性磷（AP）標記的溶質(zhì)載體家族25成員17抗體 |
CW2 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白2B1抗體 |
CTX 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的胃癌相關(guān)蛋白酪氨磷1抗體 |
hccc-9810 細胞專用培養(yǎng)基 | 堿性磷（AP）標記的載脂蛋白B-mRNA編輯復合物1抗體 |
注意事項：
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，yi酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
化工儀器網(wǎng)