ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。

1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格？可檢測多少個樣本？

產(chǎn)品規(guī)格為96T。

每次實驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)7個不同濃度，加上空白孔，標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要8個孔。因此，一個96T試劑盒最多可以測定88個樣本（不做重復(fù)且一次用完）。板條可拆卸，可滿足您少量多次實驗需求。

 

2. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何？

產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過嚴(yán)格的穩(wěn)定測試，發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報告，在市場上深受廣大客戶的贊許！

 

3.一次ELISA實驗需要多長時間？

雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要3.5-4小時，競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。

 

4.血清樣本如何處理？

全血標(biāo)本于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

 

5. 血漿樣本如何處理？

建議選擇EDTA或者檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

 

6.細(xì)胞上清液樣本如何處理？

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（1000×g）。仔細(xì)收集上清。

 

7.細(xì)胞裂解液樣本如何處理？

檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或者超聲破碎，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右（5000×g）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

 

8.組織樣本如何處理？

用預(yù)冷的PSB (0.01M,pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘，取上清檢測。

 

9.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？

小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定，可以采用競爭法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結(jié)合位點，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，最后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素等ELISA測定多用此法。

 

10.用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好？

ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進(jìn)行下載。

 

11. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦？

實驗結(jié)果不理想請及時與客服或技術(shù)支持聯(lián)系，我們可以幫您一起分析實驗結(jié)果。如果僅憑實驗數(shù)據(jù)無法判斷，您可以將試劑盒發(fā)回給我們進(jìn)行售后檢測。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題，可以為您退換貨；如果是實驗操作的問題，技術(shù)人員可以給您一些改進(jìn)的建議。

 

12.使用Elabscience ELISA Kit發(fā)表論文有獎勵嗎？

如果您使用我公司的ELISA Kit且已發(fā)表論文，可以獲得300～1000元獎學(xué)金或代金券，具體獎勵政策請咨詢銷售人員。

    

13.怎樣處理elisa實驗結(jié)果？

    1.ELISA實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于10%。

    2.平均OD值減去空白孔的OD值(競爭法不需要減空白孔的OD值)。

    3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中選擇一條最合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度最高的那條曲線。