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小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:01:27瀏覽次數(shù):223

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML豬肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,人們對這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比,對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞,則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

LSM12蛋白抗體 重組豬藍(lán)耳病病毒GP5蛋白 小鼠白介15(IL-15)ELISA檢測試劑盒

成纖維細(xì)胞激活蛋白α抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子3C多肽6/TFIIIC35封閉多肽 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA Kit

S轉(zhuǎn)移ζ1抗體 mRNA前體剪接因子PRPF40B封閉多肽 小鼠白介1α(IL-1α)ELISA試劑盒

富含亮氨軟骨蛋白抗體 重組人神經(jīng)細(xì)胞胞漿蛋白9.5蛋白 小鼠白介2(IL-2)試劑盒 ELISA

泛激活2H抗體 雙特異性磷封閉多肽16封閉多肽 小鼠白介4(IL-4)ELISA檢測試劑盒

蛋白激B單克隆抗體 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體封閉多肽 小鼠白介6(IL-6)ELISA Kit

甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1相關(guān)蛋白26抗體 腫瘤/睪丸抗原47B1封閉多肽 小鼠白介9(IL-9)ELISA試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian β防御3封閉多肽 小鼠苗條受體(LR/Ob-R)試劑盒 ELISA

膜相關(guān)環(huán)指蛋白11抗體 磷化生肌決定因子Myf5封閉多肽 小鼠瘦(LEP)ELISA檢測試劑盒

溶體相關(guān)膜蛋白1(CD107)抗體 溶血磷脂樣蛋白1封閉多肽 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA Kit

磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體 HRAS樣抑制因子3封閉多肽 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

英文名稱: FOXA1 嗅覺受體家族5亞基3封閉多肽 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒 ELISA

抗利尿激受體1B抗體 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8封閉多肽 小鼠基質(zhì)金屬2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA檢測試劑盒

谷氨受體3抗體 防御β-110/β-defensin 110封閉多肽 小鼠腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA Kit

TOMM22蛋白抗體 快速發(fā)育生長因子同源蛋白2封閉多肽 鼠抗人D-泛(Pantothenic Acid)單抗ELISA試劑盒

腫瘤蛋白D52抗體 載脂蛋白L3封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B) 試劑盒 ELISA

免疫球蛋白超家族成員10抗體 絲氨/蘇氨特定蛋白磷封閉多肽 小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽(PACAP) ELISA檢測試劑盒

胱抑B/半胱氨抑制劑B抗體 肽聚糖識別蛋白1封閉多肽 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA) ELISA Kit
小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠卵巢間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠輸卵管上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠輸卵管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠輸卵管平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠輸卵管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠子宮平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠子宮平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠卵巢表面上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠乳腺上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠乳腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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