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人外周血單個核細胞

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更新時間:2023-04-21 14:51:37瀏覽次數(shù):222

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
人外周血單個核細胞的相關(guān)產(chǎn)品:DH-82狗腎惡性組織增生癥細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLDuck embryo鴨胚胎成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100MLDuck embryo鴨胚胎成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLF81貓腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLF81貓腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人外周血單個核細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞,包括淋巴細胞和單核細胞。目前,主要的分離方法是密度梯度離心法,因為血液中各有形成分的比重存在差異,因此得以分離出不同的細胞。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼半懸浮

細胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

腺樣癌特異性相關(guān)抗原EMC1抗體 鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷門控通道蛋白2封閉多肽 j鏈(Ig-j)ELISA試劑盒

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 胰島樣蛋白3封閉多肽 人血紅蛋白β亞基(HB-β) 試劑盒 ELISA

腺苷受體蛋白抗體 環(huán)核苷陽離子通道蛋白α2封閉多肽 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA) ELISA檢測試劑盒

磷化有絲分裂原和應激活化型蛋白激1抗體 神經(jīng)激肽B受體封閉多肽 人活化Ⅻ(FⅫa)ELISA Kit

驅(qū)動蛋白KIF5B抗體 GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白封閉多肽 人游離蛋白S(FP-S)ELISA試劑盒

RALGPS1蛋白抗體 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白10封閉多肽 人異常原(APT) 試劑盒 ELISA

節(jié)律蛋白2抗體 轉(zhuǎn)運蛋白SEC16A封閉多肽 人循環(huán)免疫復合物(CIC)ELISA檢測試劑盒

整合α2(CD49b)抗體 維甲調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白封閉多肽 人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM) ELISA Kit

補體C4a+C4b蛋白抗體 SNF1/AMP激相關(guān)激2封閉多肽 人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA) ELISA試劑盒

信號調(diào)節(jié)蛋白SIRPD抗體 3號染色體開放閱讀框30封閉多肽 人纖溶原(Plg) 試劑盒 ELISA

選擇性剪接因子3B亞基2抗體 細胞色P450 2R1封閉多肽 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152) ELISA檢測試劑盒

內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁抗體 雄激受體輔活化因子267kda蛋白封閉多肽 輕鏈lambda(λ-IgLC) ELISA Kit

HDHD2蛋白抗體 磷化HIRA蛋白封閉多肽 人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA試劑盒

15號染色體開放閱讀框58抗體 磷化腎小球細胞粘附分子受體封閉多肽 人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原(CLA)試劑盒 ELISA

二羥基激抗體 心肌肌球蛋白重鏈封閉多肽 人血栓調(diào)節(jié)蛋白復合物(T-TM)ELISA檢測試劑盒

鋅指蛋白318抗體 絲氨/蘇氨SFRS8封閉多肽 人溶血補體(Hc)ELISA Kit

19號染色體開放閱讀框24抗體 c-Myc Tag多肽 人T細胞受體(TCR)ELISA試劑盒

磷化非受體酪氨激c-Abl抗體 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2封閉多肽 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)試劑盒 ELISA
人外周血單個核細胞小鼠冠狀動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠冠狀動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠頸動脈內(nèi)皮細胞英文名稱:小鼠頸動脈內(nèi)皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠頸動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠頸動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腹腔主動脈內(nèi)皮細胞英文名稱:小鼠腹腔主動脈內(nèi)皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腹腔主動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠腹腔主動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腹腔主動脈外膜成纖維細胞英文名稱:小鼠腹腔主動脈外膜成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠股動脈內(nèi)皮細胞英文名稱:小鼠股動脈內(nèi)皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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