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小鼠附睪上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:15:42瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 附睪
小鼠附睪上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:TU212人喉癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLTU212人喉癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLTU-138人喉癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLTU-138人喉癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLU118MG(U-118MG)人腦星形膠質(zhì)母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠附睪上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

附睪

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自附睪組織;附睪(Epididymis)是一個(gè)由曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),一端接著睪丸(Testis)的曲細(xì)精管,具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,可分為頭、體、尾三部。精子離開(kāi)睪丸后通過(guò)輸出小管進(jìn)入附睪。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營(yíng)養(yǎng)精子的功能,以促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存精子,促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟。精子在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力,總共停留8~17天,終達(dá)到功能上的成熟。在這個(gè)過(guò)程中,精子除了自身的因素,還受到附睪微環(huán)境的影響,這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變??梢哉f(shuō),附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件。若附睪的功能發(fā)生異常,精子則不能成熟,引起不育。附睪上皮含有主細(xì)胞、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞?;?xì)胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,在附睪各部分,其形態(tài)沒(méi)有差別,一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞;另一種主細(xì)胞,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異。除上皮細(xì)胞外,附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,而尾部平滑肌就沒(méi)有這種特點(diǎn),僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn),對(duì)保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和酸堿度,為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,而從附睪排出的只不過(guò)幾百微升,也就是說(shuō)睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會(huì)腫脹,但若結(jié)扎睪丸輸出小管,睪丸第二天就會(huì)腫脹,這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對(duì)精子的發(fā)育、成熟,,附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

精子發(fā)生相關(guān)蛋白5樣蛋白1抗體 鋅指蛋白576封閉多肽 人細(xì)胞角蛋白17(CK17)ELISA檢測(cè)試劑盒

原鈣粘附蛋白α7抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白39成員A4封閉多肽 人制瘤M受體(OSMR)ELISA Kit

8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體 受體蛋白酪氨磷F封閉多肽 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試劑盒

雄烷受體CAR抗體 重組乙型肝炎病毒E病毒樣顆粒蛋白 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)試劑盒 ELISA

B淋巴細(xì)胞基因1抗體 線粒體rRNA甲基轉(zhuǎn)移1封閉多肽 人P27蛋白(P27)ELISA檢測(cè)試劑盒

白蛋白單克隆抗體 腺苷環(huán)化10封閉多肽 人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA Kit

異質(zhì)核核糖核蛋白A/B抗體 分子伴侶CESK1蛋白封閉多肽 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒

甘氨受體β/GlyR β抗體 α胰重鏈H4封閉多肽 人大腸癌專一抗原2(CCSA-2)試劑盒 ELISA

粘脂蛋白2抗體 ELMO3蛋白封閉多肽 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA檢測(cè)試劑盒

原癌基因蛋白c-kit(CD117)抗體 基爾曼氏細(xì)小病毒VP1/VP2,大鼠潛在病毒KRV封閉多肽 人粘蛋白/粘液5B(MUC5B)ELISA Kit

磷化孤兒核受體蛋白Nur77抗體 糜C封閉多肽 人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒

蛋白酪氨磷PTPLA抗體 離子型谷氨受體4封閉多肽 人Dickkopf 1(DKK1)試劑盒 ELISA

PE-Cy5標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體 Wnt蛋白家族7B封閉多肽 人激肽釋放11(KLK 11) ELISA檢測(cè)試劑盒

精子頂端體蛋白10抗體 幾丁質(zhì)3樣蛋白3封閉多肽 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑瘤生長(zhǎng)刺激因子(GROγ/CXCL3/MGSA) ELISA Kit

含氧轉(zhuǎn)移2A抗體 磷化表皮生長(zhǎng)因子受體封閉多肽 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑瘤生長(zhǎng)刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA) ELISA試劑盒

Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體 錨蛋白重復(fù)域28封閉多肽 人美麗線蟲(chóng)凋亡基因(CED-3) 試劑盒 ELISA

果糖-2,6-二磷3/磷果糖激2抗體 c-fos封閉多肽 人胸腺白血病抗原(TLa) ELISA檢測(cè)試劑盒

KIAA1161蛋白抗體 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129封閉多肽 人腫瘤特異性移植抗原(TSTA) ELISA Kit
小鼠附睪上皮細(xì)胞人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞英文名稱:人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肝外膽管上皮細(xì)胞英文名稱:人肝外膽管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞英文名稱:人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

人肝星狀細(xì)胞英文名稱:人肝星狀細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肝Kuffer細(xì)胞英文名稱:人肝Kuffer細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人直腸成纖維細(xì)胞英文名稱:人直腸成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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