人腦成纖維細(xì)胞

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商品詳細(xì)介紹：

4.細(xì)胞簡介：

分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介：

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相：空氣，95%；CO2，5%

產(chǎn)品屬性：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

絲氨45抗體　ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白9封閉多肽　

磷化肝癌缺失基因1抗體　GalNAc-T14封閉多肽　

P21蛋白激活的蛋白激6抗體　β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接封閉多肽　

醛糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)抗體　FC段IgE受體α多肽/Fc ε RIα封閉多肽　

Cy5.5標(biāo)記小鼠抗人CD20單克隆抗體　檸檬合成CISY封閉多肽　

雙特異性磷抗體11抗體　LENG1蛋白封閉多肽　

分泌型磷脂A2抗體　中心體相關(guān)蛋白激Nek2封閉多肽　

磷化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體　炭疽桿菌致死因子LF封閉多肽　

泛蛋白連接抗體　ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白封閉多肽　

甲基轉(zhuǎn)移樣蛋白3抗體　FAM101B蛋白封閉多肽　

英文名稱: FOXA1　細(xì)胞毒性受體NK-p46封閉多肽　

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體　脂肪水解LIPJ封閉多肽　

細(xì)胞生長抑制基因39蛋白抗體　Bcl-2封閉多肽　

泛連接CUL7蛋白抗體　血栓調(diào)節(jié)蛋白封閉多肽　

同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體　活化的Notch1蛋白封閉多肽　

FAM59A蛋白抗體　類腫瘤性抗原MA3封閉多肽　

粘結(jié)蛋白SA1抗體　核孔復(fù)合蛋白Nup43封閉多肽　

囊泡胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1家族蛋白抗體　含SH2結(jié)構(gòu)域接頭蛋白B封閉多肽　
人腦成纖維細(xì)胞亞油英文名稱：亞油0.2mL

N2添加劑英文名稱：N25mL

B27無血清添加劑英文名稱：B2710mL

PBS緩沖液英文名稱：PBS500mL

DAPI英文名稱：DAPI10mL(即用型）

Triton X-100英文名稱：Triton X-10010mL

Fluoromount-G熒光封片劑英文名稱：Fluoromount-G熒光封片劑25mL
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。