詳細(xì)介紹
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱:槐角PCR鑒定試劑盒
英文名稱:Fructus sophorae
編號:BJ-P988122
分類:鑒定試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
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PCR的優(yōu)點(diǎn):
特異性好,使用特異性探針對定量分子進(jìn)行識別,具有很高的準(zhǔn)確性。
同時,靶序列由引物和探針雙重控制,假陽性低。
靈敏度高,Real-time qPCR技術(shù)是綜合了PCR技術(shù)、熒光標(biāo)記技術(shù)、激光技術(shù)、數(shù)碼顯像技術(shù)為一體的技術(shù),因此它的檢測靈敏度很高。
準(zhǔn)確性高、檢測范圍寬,由于熒光信號的產(chǎn)生和每次擴(kuò)增產(chǎn)物成線性對應(yīng)的關(guān)系,通過熒光信號的檢測可以直接對產(chǎn)物進(jìn)行定量;定量范圍可在0-1010拷貝/毫升。
操作簡單、安全、無污染,擴(kuò)增和檢測可以在同一管內(nèi)進(jìn)行,不需要開蓋,不易污染,同時擴(kuò)增和檢測一步完成,不需要后期處理,不再需要擔(dān)心放射性污染。
速度快、通量高,可在2-3小時內(nèi)完成96個樣品的定量分析。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
數(shù)據(jù)采集:
具體操作按所用儀器推薦的流程進(jìn)行。本產(chǎn)品中所含的熒光染料在不結(jié)合DNA 時,最大吸收光譜在 471nm,結(jié)合 DNA 時的最大吸收光譜在 500nm,最大發(fā)射光譜在 530nm。
數(shù)據(jù)處理:
以 Cps 陽性對照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品濃度的 log 為橫軸,以 Ct 值為縱軸,通過待測樣品的 Ct 值計算出樣品 DNA 的濃度。
防御素β123(DEFβ123)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFKFB2 ELISA Kit包裝5g
防御素β124(DEFβ124)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit包裝1g
防御素β125(DEFβ125)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFKFB3 ELISA Kit包裝25g
防御素β128(DEFβ128)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PEX5 ELISA Kit包裝5g
防御素β130(DEFβ130)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PEX5L ELISA Kit包裝100ml
防御素β131(DEFβ131)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFTK1 ELISA Kit包裝500ml
TAO激酶3(TAOK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PEX7 ELISA Kit包裝100g
Midasin蛋白(MDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFDN1 ELISA Kit包裝25g
絲氨酸組合因子5(SERINC5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFDN4 ELISA Kit包裝1g
突觸囊泡蛋白Ⅹ(SYT10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit包裝5g
核糖核酸酶A10(RNASE10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PFDN5 ELISA Kit包裝250mg
Rhotekin 2蛋白(RTKN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Human PES1 ELISA Kit包裝100g
槐角PCR鑒定試劑盒拜氏梭菌Human TRIM25 ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium beijerinckii
瓜類鞘氨單胞菌Human TRIM24 ELISA Kit拉丁屬名: Sphingomonas melonis
大腸埃希氏桿菌Human TRIM2 ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
假單胞菌屬Human TRAT1 ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas sp
米氏假單胞菌Human TRAV20 ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas migulae
大腸埃希氏菌Human TRIM23 ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
大腸埃希氏菌Human SRSF2(Serine/arginine-rich splicing factor 2) ELISA Kit拉丁屬名: Escherichia coli
球孢鏈霉菌黃色變種Human TRBV5-4 ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces globisporus var. flavus
棒曲霉Human DCT(L-dopachrome tautomerase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus clavatus