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小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:22:49瀏覽次數(shù):250

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 脈絡(luò)膜組織
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HT-29 (HT29)人結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HTMC人眼小梁網(wǎng)細(xì)胞 人細(xì)胞系1×106HTR-8/SVneo人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 人細(xì)胞系1×106HPNE人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HUCCT1人膽管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

脈絡(luò)膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自眼球脈絡(luò)膜組織;脈絡(luò)膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細(xì)胞,對(duì)外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差,當(dāng)眼球受到從前面來(lái)的外力的沖擊作用通過(guò)玻璃體傳到后極部時(shí),堅(jiān)硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡(luò)膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡(luò)膜呈暗褐色,圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡(luò)膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細(xì)血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網(wǎng)膜之間,續(xù)連于睫狀體后方。脈絡(luò)膜的血循環(huán)營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營(yíng)養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時(shí)對(duì)視覺系統(tǒng)起保護(hù)作用,對(duì)整個(gè)視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)作用。續(xù)連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細(xì)胞,有營(yíng)養(yǎng)和遮光作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

鋅指蛋白201抗體 神經(jīng)腫瘤Nova1抗原封閉多肽 人流感病毒A(FLUA)ELISA試劑盒

鋅指蛋白ZNF515抗體 磷化核有絲分裂器NuMA蛋白封閉多肽 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)試劑盒ELISA

人前列腺特異性抗原單克隆抗體 PARD6G蛋白封閉多肽 人抗乙型肝炎病毒核心抗體(HBcAb)ELISA檢測(cè)試劑盒

絲氨肽4抗體 磷化核糖體蛋白S6激家族RSK3封閉多肽 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體(HBcAb-IgM)elisa試劑盒

磷化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體 Notch轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白R(shí)BPJK封閉多肽 人抗乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)試劑盒elisa

酪氨相關(guān)蛋白1抗體 磷脂磷酯LPIN1封閉多肽 人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)檢測(cè)試劑盒elisa

G氨基丁受體β2/GABAA Rβ2抗體 脯氨酰羧肽封閉多肽 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM(EHF)ELISA試劑盒

信號(hào)通路Wnt5a抗體 17號(hào)染色體開放閱讀框49封閉多肽 人抗狂犬病毒抗體(anti-RV)試劑盒ELISA

唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體 載脂蛋白E4封閉多肽 人抗甲型肝炎病毒IgM抗體(anti-HAV)ELISA檢測(cè)試劑盒

粘蛋白-1抗體 半乳糖神經(jīng)酰胺封閉多肽 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體(anti-HAV)elisa試劑盒

磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1封閉多肽 人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIVIgM)試劑盒elisa

絲氨/蘇氨/酪氨激STYK1抗體 抗肌蛋白封閉多肽 人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化有絲分裂激A抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體4封閉多肽 人抗丙型肝炎病毒抗體(anti-HCV)ELISA試劑盒

熱休克蛋白27抗體 恒定生物鐘同源蛋白TIM1封閉多肽 人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)試劑盒ELISA

突觸相關(guān)蛋白-1抗體 嗅覺受體52E6封閉多肽 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌O((LLO)ELISA檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)腫瘤Nova2抗原抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框56封閉多肽 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)elisa試劑盒

細(xì)胞角蛋白18單克隆抗體 磷化皮層肌動(dòng)蛋白封閉多肽 人腺相關(guān)病毒(AAV)試劑盒elisa

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike Neutralizing 核糖體RNA合成蛋白40封閉多肽 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞MDA-KB2人乳腺細(xì)胞英文名稱:MDA-KB21×106L15+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-1571×106L15+10%FBS +1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-2311×106L15+10%FBS +1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

MDA-MB-231+GFP人乳腺癌X細(xì)胞+GFP英文名稱:MDA-MB-231+GFP1×106L15+10%FBS+1%P/S提供MDA-MB-231鑒定報(bào)告

MDA-MB-231+LUC人乳腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:MDA-MB-231+LUC1×106L15+10%FBS+1%P/S提供MDA-MB-231細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

MDA-MB-361人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-3611×106L15+20%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-4151×106L15+10%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

 


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