鈣網(wǎng)蛋白（CRT）ELISA試劑盒說明書

試劑盒內(nèi)包含了ELISA實(shí)驗(yàn)所需的所有試劑和相關(guān)組份。簡(jiǎn)單快捷的方案設(shè)計(jì)和優(yōu)化的試劑配比，為科研工作者提供ELISA實(shí)驗(yàn)分析方案。
試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑，操作簡(jiǎn)單便捷；試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，確保更高的檢測(cè)靈敏度
產(chǎn)品名稱：鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書
英文名稱：CRT ELISA Kit
規(guī)格：96T/48T
分析類型：夾心ELISA
樣本類型：血清、血漿、細(xì)胞上清等液體樣本
產(chǎn)品型式：96孔板，可拆
貯存方法：試劑盒未拆開，4℃保存。已拆開，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，其它4℃保存。
運(yùn)輸條件：4℃
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組成：
1 30倍濃縮洗滌液      20ml×1瓶
2 酶標(biāo)試劑                 6ml×1瓶
3 酶標(biāo)包被板              12孔×8條
4 樣品稀釋液              6ml×1瓶
5 顯色劑A液               6ml×1瓶   
6 顯色劑B液               6ml×1/瓶  
7 終止液                     6ml×1瓶
8 標(biāo)準(zhǔn)品                     0.5ml×1瓶
9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液           1.5ml×1瓶
10 封板膜                   2張
樣品收集、處理及保存方法
1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速 小心地分離。
2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
樣本要求 
1．樣本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-577Phospho-HER4 (Tyr984)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-578Phospho-HER4 (Tyr1284)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人前列腺癌細(xì)胞；PC-3-Cas9-579Phospho-HER4 (Tyr1162)  磷酸化HER4抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-580Phospho-HER4 (Tyr1188)  磷酸化HER4抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-581c-fos  c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-582TACC2/ AZU1  轉(zhuǎn)化酸性卷曲含蛋白質(zhì)2100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-583TPX2  微管相關(guān)同源蛋白TPX2抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-584Phospho-c-Fos (Ser32)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-585Phospho-c-Fos(Thr232)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-586Phospho-c-Fos (Thr325)  磷酸化c-fos抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-587CFTR  囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-588CG6856/CG6856-PA  果蠅CG6856-PA抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-589VAV3  鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體20 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-590CGA/ Chromogranin A  嗜鉻粒素A抗體100µl

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-591phospho-VAV3(Tyr173)  磷酸化鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體100µg

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞；HEC-1-B-Cas9-592CKAP5/ch TOG  結(jié)腸和肝腫瘤高表達(dá)蛋白抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞；NCI-H1975-Cas9-594CGB  嗜鉻粒素B抗體100 ul

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞；NCI-H1975-Cas9-595CGRP/CGRP2  CGRP降鈣素基因相關(guān)肽抗體100 ul
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒說明書C ret/RET /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、指狀蛋白R(shí)ETIgG

Phospho-Ret (Tyr905) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化指狀蛋白R(shí)ETIgG

Phospho-Ret (Tyr1062)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化指狀蛋白R(shí)ETIgG

CYP2E1/FITC  熒光素標(biāo)記抗細(xì)胞色素P450ⅡE1IgG

CYP3A4/FITC  熒光素標(biāo)記抗細(xì)胞色素P450 3A4IgG

CYP8A1/PTGIS/FITC  熒光素標(biāo)記前列環(huán)素合成酶IgG

CYP19/FITC  熒光素標(biāo)記細(xì)胞色素P450 19IgG

CYP21/FITC  熒光素標(biāo)記21-羥化酶IgG

Cyr61/FITC  熒光素標(biāo)記富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61IgG
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。